Rho激酶抑制剂对大鼠脑缺血再灌注后NF-κB、FKN表达的作用.pdfVIP

摘要 B、 Rho激酶抑制剂对大鼠脑缺血再灌注后NF．K FKN表达的影响 研究生苏春贺 导师娄季宇张燕柳 郑州大学第二附属医院神经内科 河南 郑州450014 平煤集团总医院神经内科 河南 平顶山467000 摘要 背景和目的 脑血管病是危害人类生命健康的常见病和多发病，其中缺血性脑血管疾病 约占一半以上。随着医疗水平的不断进步，溶栓治疗也越来越广泛地应用到临 床。溶栓后缺血侧脑组织重新恢复血流，但再灌注在挽救濒死的脑细胞同时也 带来了一系列的损伤，即为缺血再灌注损伤(ischcmia roperfusioninjury,VR)。缺 血再灌注损伤有众多因素参与组成，目前研究发现主要包括：兴奋氨基酸毒性、 钙超载、氧自由基损伤、细胞凋亡及炎症反应等。其中炎症反应在脑缺血再灌 注后病理生理过程中发挥重要作用，一直是国内外医学研究者研究的重点。 factor-KB，NF．K 核转录因子(Nuclear B)是具有多向性调节作用的核蛋 白因子，在中枢神经系统中，主要存在于神经元、神经胶质细胞及脑血管内皮 细胞，参与调控多种基因的表达，在炎症、免疫反应等方面发挥重要作用。NF- KB激活后可诱导黏附分子、炎症因子、趋化因子的表达增加，使白细胞在缺血 区聚集、黏附、侵润，加重脑缺血再灌注损伤。 不仅是一种趋化因子，同时还兼有黏附活性，常表达在活化的血管内皮表面， 在参与白细胞转运、黏附、加快炎性因子渗出，促进炎症级联反应发生等方面 摘要 发挥重要作用。 Rho激酶是小G蛋白Rho的重要下游底物，参与细胞粘附、迁移、平滑肌 收缩及细胞骨架蛋白重构等方面具重要生理作用。作为一种Rho激酶抑制剂， 法舒地尔最初被用来缓解脑血管痉挛，治疗蛛网膜下腔出血。其脑保护作用可 能与抑制Rho激酶活性有关，通过增加缺血侧脑组织中eNOS的表达，舒张血 管；保护缺血区神经元；抑制缺血区白细胞渗出，减轻炎症损伤。 本实验通过建立大鼠脑缺血再灌注模型，观察大鼠脑缺血再灌注后神经功 能损伤变化，用聚合酶链式反应技术观察缺血侧脑组织中NF．K Bp65mRNA、 FKNmRNA表达，并以法舒地尔作为干预手段，探讨法舒地尔对脑缺血再灌注 后炎症反应方面的影响并探讨其可能机制，为临床治疗方面提供一定的科学依 据。 ‘ 。 材料与方法 成年健康雄性SD大鼠90只，体重(300-、-330)g，随机分为三组：假手术组、 模型组、法舒地尔治疗组，每组30只大鼠，然后按再灌注时间不同又分为6h、 12h、24h三个亚组，每个时间点lO只大鼠。参考Zea Longa线栓法制作大鼠大脑 中动脉缺血再灌注损伤模型，治疗组术前lh腹腔注射法舒地尔15mg／kg，再灌注 同时同剂量再次给药，假手术组及模型组同样方法腹腔注射同剂量生理盐水 鼠达到相应时间点断头取脑，反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测缺血侧脑 组织中NF·lg,Bp65mRNA、FKNmRNA的表达。 结果 l神经功能缺损评分：假手术组大鼠未出现明显的神经功能缺损症状； 模型组大鼠神经功能缺损症状较明显，法舒地尔治疗组同时间点大鼠神经功能 缺损症状较模型组有所改善，神经功能评分差异有统计学意义(序O．05)。 2缺血侧脑组织中NF-K Bp65mRNA表达：假手术组三个时间点均有 少量表达，三个时间点之间无明显差异：模