SIRT1在肺动脉高压血管重塑中的作用及机制研究.pdfVIP

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2017-09-03 发布于贵州
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SIRT1在肺动脉高压血管重塑中的作用及机制研究.pdf

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SIRT1在肺动脉高压血管重塑中的作用及机制研究

目录 EjjiE…………………………………………………………………………………………………………………………………i 摘要………………………………………………………………………………………………………………………………．．1 Abs仃act…………………………………………………………………………………………………………………………。3 前言………………………………………………………………………………………………………………………………．5 l肺动脉高压预后差，治疗难…………………………………………………………………5 2肺动脉平滑肌细胞增殖与肺动脉高压………………………………………………………5 2．1血管平滑肌增殖是血管重塑的重要细胞学基础…………………………………………5 2．2肺血管重塑与肺动脉高压的发生、发展密切相关………………………………………6 3血管平滑肌细胞周期及其调控………………………………………………………………6 3．1血管平滑肌细胞的增殖周期………………………………………………………………6 3．2细胞周期调控………………………………………………………………………………7 4 K+通道蛋白与肺动脉平滑肌增殖以及PAH的关系………………………………………。8 5 SIRTl在肺动脉平滑肌增殖，肺动脉高压发生、发展中可能发挥的作用………………9 6SIRTl是否能抑制肺动脉平滑肌增殖并延缓肺动脉高压的发生、发展是本研究的重点lO l 实验材料…………………………………………………………………………………………．1 1病毒………………………………………………………………………………………………………………………．．1l ：!细胞………………………………………………………………………………………………………………………．．1l l 3实验用大鼠及饲料…………………………………………………………………………．1 4酶罗乓………………………………………………………………………………………………………………………．．11 ．5其他主要试剂……………………：……………………：……………………………………．11 6实验用抗体…………………………………………………………………………………．．1l 7主要仪器设备…………………………………………………………………………………12 实验方法…………………………………………………………………………………………13 1人肺动脉平滑肌细胞(HP：ASMC)培养与腺病毒感染…………………………………．．13’ 1．1人肺动脉平滑肌细胞传代培养…………………………………………………………．．13 3 1．2人肺动脉平滑肌细胞的冻存………………………………………………………………1 1．3人肺动脉平滑肌细胞的复苏………………………………………………………………．13 1．4人肺动脉平滑肌细胞的腺病毒感染……………………．．．…………．．．…………………13 1．5人肺动脉平滑肌细胞同步化处理………………………………………………………．．14 2重组腺病毒的制备…………………………………………………………………………．14 2．1建立备用病毒……………………………………………………………………………～14 2．2重组腺病毒的生产…………………………………………………………………………14 5 2．3病毒纯化…………………………………………………………………………………～1 5 2．4重组腺病毒质量检测．．：…………………………二…………………：…j…………………1 3 R，r-PCR…………………………………