T细胞来源Exosomes调节妊娠丢失孕鼠母胎界面CTLA-4FoxP3表达的探究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 英文缩写……………………………………………………………………8 FoxP3的研究 前言……………………………………………………………………9刖吾…………………………………………………………………… 材料与方法…………………………………………………………10 结果……………………………………………………………………14 附图……………………………………………………………………16 附表……………………………………………………………………21 讨论……………………………………………………………………22 结论……………………………………………………………………24 参考文献………………………………………………………………25 综述调节性T细胞与Thl7免疫失调与临床疾病关系的研究进展……28 致谢…………………………………………………………………………41 个人简历……………………………………………………………………42 万方数据 中文摘要 T细胞来源Exosomes调节妊娠丢失孕鼠 母胎界面CTLA．4及FoxP3表达的研究 摘 要 目的：正常妊娠的发生和维持有赖于母体对胚胎半同种抗原的免疫耐 受，一旦该状态被打破将导致流产的发生。连续发生3次或3次以上的反 复性妊娠丢失患者中，约50％并无明确临床病因，称为不明原因反复自然 妊娠丢失(URSA)。研究妊娠过程中母胎免疫耐受形成的确切机制，诱 导母胎免疫耐受的形成是治疗URSA的关键。 目前国内外多采用丈夫或第三方淋巴细胞对患者进行主动免疫治疗， 但是细胞需新鲜制备，且稳定性差、不易保存，具有明显局限性，不利于 临床推广。本研究采用自发性流产动物模型，通过过继转输淋巴细胞及其 方法： l雄性无关个体脾细胞及其Exosomes的制备：摘眼球放血后断颈处 死BALB／c雄鼠，无菌条件下解剖取脾组织，制各脾单个细胞悬液，采用 蔗糖密度梯度离心联合超滤技术制取脾脏T细胞来源Exosomes。 2建立妊娠丢失实验动物模型及实验分组：雌雄小鼠随机按2：1合笼 别为：妊娠丢失组(URSA组，孕第4日着床期尾静脉注射生理盐水)， 细胞治疗组(Cellular Therapy组，孕第4日着床期尾静脉注射雄鼠脾细 胞)，非细胞治疗组(Non—cellularTherapy组，孕第4日着床期尾静脉注 射Exsomes) 3各组胚胎发育情况的观察：于妊娠第14日处死各组CBA／J孕鼠， 无菌条件下解剖，取胎盘组织，测量胎盘各径线计算胎盘体积，分别计数 各组胚胎吸收及存活个数，计算各组胚胎吸收率及妊娠丢失率。 万方数据 中文摘要 以灰度值(GS)表示，数值大小与阳性表达强度呈反相关；以矩形走形计数 200个细胞，计算各组阳性细胞表达百分率。 5统计学处理：各组数据均通过SPSSl3．0版本软件进行正态性、方 差齐性检验。采用卡方检验比较各组孕鼠胚胎发育情况，采用F检验对孕 法进一步对多个样本均数进行两两比较。 结果： 1不同过继转输对妊娠丢失孕鼠胚胎发育的影响 组相比，细胞治疗组及非细胞治疗组胚胎吸收率均显著下降(均P0．01)， 低于细胞治疗组职0．05)。 组相比，细胞治疗组及非细胞治疗组妊娠丢失率均显著下降(均P0．01)， p0．05)。 2妊娠丢失孕鼠母胎界面CTLA．4、FoxP3表达变化的分析 2．1母胎界面CTLA．4表达变化的分析 1．60％士2．41％， Control组孕鼠胎盘组织中CTLA．4阳性细胞百分率为3 较有统计学意义(P