大肠癌化疗敏感蛋白标记分子hn RNP K和肠癌相关miRNA的筛选和基础应用研究.pdf

RNP i RNA 大肠癌化疗敏感蛋白标记分子hn K及肠癌相关m 的筛选及基础应用研究 摘要 目的：利用蛋白质组学、基因表达谱技术寻找有潜在临床价值的 大肠癌生物标志物。 方法： 后的差异蛋白表达的影响，寻找结直肠癌化疗疗效潜在标志物，凝胶 电泳图谱进行分析发现：5．Fu作用前后，大肠癌肿瘤细胞的蛋白表达 谱有显著不同，且不同恶性程度的细胞具有不同的蛋白表达趋势变 化，通过质谱鉴定和分析，肠癌细胞对化疗药物作用所产生的hnRNP K、PDI两种蛋白表达趋势及量的规律性改变，可作为大肠癌化疗疗 效及化疗反应的客观指标指导临床用药； (2)通过对人大肠癌不同侵袭力细胞株进行miRNA全谱及基 因表达谱分析，利用miRNA表达趋势的显著性STC分析及多重比较 网络中的关键miRNA取交集得到大肠癌特异性的规律性表达的差异 miRNA； (3)利用microRNA基因表达谱芯片分别从大肠癌四种细胞系 结肠正常上皮粘膜细胞(NCM460)中筛选规律性差异表达 进行组织学和细胞学验证，并应用生物信息学分析其潜在的靶标及功 能。 (4)利用microRNA基因表达谱芯片分别从大肠癌四种细胞系 用生物信息学分析其潜在的靶标及功能。 结果： (1)细胞水平蛋白质组学分析发现：5-FU作用前后，大肠癌肿 瘤细胞的蛋白表达谱有显著不同，且不同恶性程度的细胞具有不同的 蛋白表达趋势变化，通过质谱鉴定和分析，肠癌细胞对化疗药物作用 所产生的hnRNPK、PDI两种蛋白表达趋势及量的规律性改变，可作 为大肠癌化疗疗效及化疗反应的客观指标指导临床用药； 显著性STC分析及多重比较检验进行样本的差异基因筛选发现大肠 癌特异性的规律性表达的差异miRNA：hsa．1et．7i； 组织学和细胞学验证，并应用生物信息学分析其潜在的靶标及抑制大 肠癌增殖、分化、侵袭、迁移的生物学功能。 ¨ 肠癌转移潜能相关的miRNA．221的通过抑制靶基因p27促进大肠癌 侵袭、增殖的癌基因作用。 结论：通过蛋白组学、microRNA表达谱差异分析，找出了大肠 癌相关的特异性差异表达蛋白、microRNA作为大肠癌候选生物标记 物，并证实了这些候选生物标志物在大肠癌发生发展中潜在的临床应 用价值。 关键词：大肠癌，肿瘤标记物，蛋白质组学，microRNA IIl andmechanismresearchforcolorectalcancer Screening markerofhnRNPKandcolorectal chemotherapy—sensitiveprotein cancer-relatedmiRNA ABSTRACT Objective： forthe clinicalvalueofbiomarkersfor Searching potential colorectalcancer the andmiRNA throughproteomic technology． Methods： the involvedinthe identifychemotherapy-related (1)To proteins ofCRC humancolorectalcancercelllinesof 5一FU，two respondenceby differentm