大肠埃希菌等质粒介导的喹诺酮类耐药基因检测和耐药性研究.pdfVIP

’^一 r^ l。t ：。 、 1Ill l l IIilllllll1 11 IIlltltlIlll 1773 ＼180 目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………．4 研究论文大肠埃希菌等质粒介导的喹诺酮类耐药基因检测及 耐药性研究 前言………………………………………………………………………………………7月O吾………………………………………………………………………………………’7 材料与方法……………………………………………………………．7 结果……………………………………………………………………………………．．13 附图……………………………………………………………………………………．．15 附表……………………………………………………………………………………．．19 讨论……………………………………………………………………………………．24 参考文献……………………：………………………………………………28 综述……………………………………………………………………………………………．32 致谢……………………………………………………………………………………………．40 个人简历………………………………………………………………．．41 主塞垫璺 大肠埃希菌等质粒介导的喹诺酮类耐药基因检测及耐药性研究 摘 要 quinolone 目的：质粒介导的喹诺酮类耐药(plasmid—mediated resi qnr(quinolone 酶(ESBLs)或AmpCB一内酰胺酶(AmpC酶)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和 阴沟肠杆菌中3类(qnr、aac(6 了解PMQR基因的流行特征及对16种抗生素的耐药特点，为控制PMQR菌感 染提供资料。 方法： 1肠杆菌科细菌的分离与鉴定 324株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌分离于河北医科大学 第二医院、河北医科大学第四医院、 白求恩国际和平医院、石家庄市第 一人民医院、保定徐水人民医院、沧州市第一人民医院及石家庄市中心医 院。其中大肠埃希菌139株，肺炎克雷伯菌108株、阴沟肠杆菌77株。标本 来源：痰液140株、尿液77株、血液18株、分泌物17株、穿刺液7株、脑脊 液5株以及其它标本60株。对收集到的菌株先转种于血琼脂培养基上，再 用肠杆菌科鉴定系统APl20E进行复核鉴定，确保鉴定菌株种属的准确性。 2细菌的耐药性及耐药酶的检测 敏感性测定；采用双纸片协同试验检测了ESBLs携带情况，采用抗菌药物 及抑制剂组合耐药表型筛选法检测了AmpC酶的携带情况。 ’ 3qnr基因的检测 采用聚合酶链反应(PCR)方法，对产ESBLs或AmpC13一内酰胺酶的菌 qepA检测，对琼脂糖凝胶电泳阳性产物进行测序，测序结果应用GenBanK -Blast、Dnaman软件上网比对，确认所测基因。 结果： 士塞垫璺 测 5株产酶菌的构 酶，2．79％为单产AmpC酶，3．40％为产ESBLs+AmpC酶。11 酶、6．49％为单产AmpC酶、5