大鼠在体心脏心肌缺血后处理模型的探究.pdfVIP

中 文 摘 要 大鼠在体心脏心肌缺血后处理模型的研究 摘 要 目的：通过建立大鼠在体心脏心肌缺血再灌注损伤（Myocardial Ischemia Reperfusion Injury ，MIRI ）模型，采用不同时间的缺血后处理 （ischemic postconditioning，IPO ），观察大鼠心肌梗死面积、心肌酶、心 电图及血流动力学的变化，寻找产生最佳心肌保护作用的大鼠在体心脏缺 血后处理方式，建立稳定的大鼠在体心脏缺血后处理模型。 方法：选择81只250-300克实验用Sprague-Dawley(SD)大鼠（雄性）， 随机分成9组：I/R组(缺血再灌注损伤组，n=9) ，阻断冠状动脉左前降支(1eft anterior descending,LAD)40分钟，再灌注120分钟；缺血预处理组 (ischemic preconditioning ，IPC，n=9) ，三次短暂阻断/再通LAD( 闭塞5分钟，再灌注 10分钟，循环三次) ，阻断LAD40分钟，再灌注120分钟；IP0组(缺血后处 理组) ，分为六个亚组，于阻断LAD40分钟后分别行3次不同时间的IPO ： （A ）IPO AI-p3-10s组(n=9) ：再通10秒，阻断10秒，重复三次，再灌注120 分钟；（B ）IPO AI-p3-20s组(n=9) ：再通20秒，阻断20秒，重复三次，再 灌注120分钟；（C ）IPO AI-p3-30s组(n=9) ：再通30秒，阻断30秒，重复 三次，再灌注120分钟；（D ）IPO AI-p3-40s组(n=9) ：再通40秒，阻断40 秒，重复三次，再灌注120分钟；（E ）IPO AI-p3-50s组(n=9) ：再通50秒， 阻断50秒，重复三次，再灌注120分钟；（F ）IPO AI-p3-60s组(n=9) ：再 通60秒，阻断60秒，重复三次，再灌注120分钟；NC组 （空白对照组，n=9 ）。 所有动物术前禁食、水4小时，全麻后仰卧位固定，连接四肢心电电极， 气管切开，呼吸机辅助，胸部正中切口，剪开胸骨，显露心脏。所有动物 第一次阻断LAD前分别给予肝素500单位/公斤，以防止血栓形成，经胸廓 壁在左室心尖部无血管区置入穿刺套管针，连接压力传感器及监测仪，记 录心电图及左室内压变化。观测指标：1 血清生化指标：① CK-MB测定： 各组于冠状动脉再灌注前15分钟和120分钟末分别从颈动脉取血，在全自 动生化分析仪上测定CK-MB 。② SOD测定：各组于冠状动脉再灌注前15 分钟和120分钟末分别从颈动脉取血，分离血清，-20℃保存待测。2 心肌 梗死面积测定：取血毕，迅速取下心脏，原位阻断LAD ，经主动脉逆灌 1 中 文 摘 要 Even’s蓝，分离出左室心肌行横切片， TTC法染色，分离坏死区与非坏 死区后称重，梗死范围以坏死心肌质量占缺血心肌质量的百分比表示。3 血流动力学指标：在LAD 阻断前15 min、LAD再灌注15 min、60 min、120 min ，共4个时间点，分别用RM6240C生理信号采集系统记录心率(HR)、 左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室内压上升最大 速率(+dp/dtmax)和左心室内压下降最大速率(-dp/dtmax)的波形及数值，所 有数据均以均数±标准差表示,用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析处理。 结果：1 血清生化指标：① CK-MB测定结果表明：CK-MB基础水平 在各组并无差别。在再灌注120分钟血CK-MB水平在IR组、IPC组、IPO组 各亚组均较同时刻空白对照组显著升高，表明各组均存在缺血再灌注损 伤，但IPC组及IP0组各亚组均低于IR组(P0 ．05)，且IPO各亚组之间、IPC 组与IPO各亚组之间均无明显差别，提示3轮10秒、20秒、30秒、40秒、 50秒、60秒的后处理具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用。② SOD测定 结果表明：SOD基础水平在各组并无差别。在再灌注120分钟IPC组与IPO 组各亚组血SOD含量较同时刻对照组均显著降低,