大鼠心死亡供体肝脏热缺血线粒体损伤的探究.pdfVIP

lIIIII I III I I I I r l llll llI Y1 目 录 一、摘要……………………………………………………………………………(1) 中文论著摘要…………………………………………………………………(1) 英文论著摘要…………………………………………………………………(3) 二、英文缩略语……………………………………………………………………(5) 三、论文 1．． 。前‘言………………………………………………………………………(6)日U舌………………………………………………………………………Lb) 2． 实验材料与方法…………………………………………………………(7) 3． 实验结果(附图表)……………………………………………………(10) 4． 讨论……………………··………………………………·……………(14) 5． 结论……………………………………………………………………(16) 四、本研究创新性自我评价……………………………………………………(17) 五、参考文献……………………………………………………………………(18) 六、附录 1． 综述(含参考文献)………………………………………………(20) 2． 致谢……………………………………………………·…………··(28) 3． 个人简介……………………………………………………………(29) ·中文论著摘要· 大鼠心死亡供体肝脏热缺血线粒体损伤的研究 目的 线粒体作为细胞器，是真核细胞活动的主要供能单位，线粒体是细胞发生呼 吸作用的主要场所。线粒体氧化磷酸化的电子传递链，又叫线粒体呼吸链，位于 线粒体内膜上，由四个分子量很大的跨膜蛋白复合体组成，功能是进行生物氧化 并产生能量分子ATP。线粒体功能直接影响组织器官的活性，到目前为止，在肝 移植方面没有很好的供体器官活性判定标准。本研究旨在从大鼠心死亡供体不同 热缺血时问肝脏线粒体形态及功能方面损伤的变化，探讨心死亡供者肝脏活性， 为临床肝移植提供心死亡供体肝脏活性的判定可行性。 方法 对42例不同热缺血时间条件下的心死亡大鼠肝脏标本进行超薄切片，透射电 镜观察肝细胞结构改变并摄片。同时每组每个动物切片随机选择5个视野，每个 视野选取20个线粒体透射电镜观察线粒体结构并行Flameng评分进行半定量分 析。提取肝脏线粒体，进而运用分光光度法测定呼吸链复合酶Ⅳ即细胞色素C氧 化酶(CCO)的活性。单因素方差分析线粒体损伤程度及CCO活性与零点病例变 化差异。 结果 电镜下可见，10分钟内肝细胞无明显改变，15分钟之后变化明显，表现为肝 细胞的肿胀，糖原减少，细胞核染色质浓缩。至热缺血60分钟，但大部分细胞仍 为可逆性变化具有可复性，只有小部分细胞表现不可逆损伤。电镜下观察线粒体 结构损伤，Flameng评分随着热缺血时间的延长而增加，半定量分析P值小于O．05， 有统计学意义，但线粒体的损伤仅限于III级，极少部分达到Ⅳ级。线粒体CCO热 缺血60分钟时才发生明显的酶活性降低，0．30分钟无明显酶活性改变PO．05， 45分钟有所下降。 结论 心死亡供体肝脏随着热缺血时间延长，出现线粒体的形态功能逐渐损伤，而 作为真核细胞的主要能量供体，直接导致肝脏活性的下降，从而影响心死亡供体 肝脏的移植效果。从研究结果可见10分钟内肝脏及线粒体结构功能损伤程度均 不明显，30分钟之后改变明显，而60分钟之内肝脏的损伤仍可为之安全。 关键词 心死亡，肝移植，线粒体，细胞色素C氧化酶 2 ● 英文论著摘要 ofmito