夫妇间HLa-B基因多态性及子痫前期相关性研究.pdfVIP

摘要 夫妇间HLA．B基因多态性与子痫前期相关性研究 研究生 刘文霞 导师 张展 专业 妇产科 郑州大学第三附属医院 河南 郑州450052 摘 要 背景和目的 disorder$ complication 伴有心、脑、肝、肾等多种脏器功能损害，是孕产妇和围生儿死亡的主要原因 之一。临床特点是：妊娠20周后出现持续性高血压、蛋白尿、水肿等症状，并 于分娩后上述症状逐渐减轻，产后12周消失。其流行病学特征主要表现为：多 发生于首次接触绒毛组织的妊娠者；母体与绒毛组织接触过多的妊娠者，如双 胎、葡萄胎、糖尿病等；有妊娠期高血压疾病遗传倾向者。关于子痫前期的发 病机制一直都是围产医学领域研究的热点，目前研究公认的发病机制有：滋养 细胞功能异常学说、免疫调节功能异常导致的母．胎界面免疫失衡学说、遗传学 说、氧化应激学说。近年来学者们越来越关注免疫遗传机制在子痫前期中的发 病作用。子痫前期的发生与母体免疫状态的改变密切相关，而且其特征性病理 变化就是子宫螺旋小动脉生理性铸障碍，出现急性动脉粥样硬化性改变，和急 性移植排斥反应的免疫异常相似。人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen， HLA)在器官移植过程中是引起移植排斥反应的主要组织相容性抗原，作为免疫 学上一个重要的免疫遗传因子，其多态性的研究也是生殖免疫和遗传学的热点， 则其在子痫前期的发病中也起着不可忽视的作用。 子痫前期过去往往被认为是孕妇单方面的疾病，其实正常妊娠是一种成功 的半同种移植现象，携带有父源性基因的胎儿作为半同种移植物植入母体内并 没有发生母胎排斥现象，反而形成一种免疫耐受，说明免疫机制在妊娠过程中 摘要 起着重要的作用。母体对胎儿所携带的父源性HLA基因的免疫识别作用可能参 与子痫前期的发病。并且以往我们课题组的研究结果发现： (1)父源性 基因配伍模式与子痫前期的发病相关。本实验主要通过对子痫前期患者及其配 偶免疫功能及遗传背景的研究来探讨HLA．B基因多态性与子痫前期的相关性， 将有助于深入探讨疾病的发生机制，并为该病的防治提供理论依据。 资料和方法 l研究对象 选择2008年lO月至2010年12月在郑州大学第三附属医院产科住院，经 临床确诊的92例子痫前期患者，其中收集到丈夫血液的37例为病例组。诊断 标准按人民卫生出版社第七版《妇产科学》，所用研究对象均排除内分泌疾病、 慢性高血压病、肾脏疾病、糖尿病、肿瘤、炎症等，且所有子痫前期患者均随 访至产后12周。另选择同期在我院产科住院分娩的正常健康孕妇95例，其中 38例收集到丈夫血液为对照组，均因社会因素进行剖宫产。两组研究对象均为 中国河南汉族人、无异族通婚史、无血缘关系、无内科合并症。 2方法 2．1标本采集 于住院分娩前采集夫妻外周静脉血各2ml，采用3．8％枸橼酸钠抗凝 (EDTA)，．80℃冰箱冻存待检。 2．2基因组DNA提取 采用上海莱枫生物科技公司提供的哺乳动物血液基因组DNA提取试剂盒， 按说明书进行操作。提取出的DNA用紫外分光光度计检测其浓度及纯度，DNA 纯度A260／A280值为1．6—1．9，浓度调整至100 ng／lal，一20。C保存备用。 2．3 HLA．B基因分型 流式反向特异序列寡核苷酸探针(PcR．sso)基因分型技术，试剂由上海复旦 张江生物医药公司提供的优诺基HLA．SSO分型试剂盒。原理为：将大量基因探 II 摘要 针包被于纳米大小的微珠上，与扩增的DNA片段杂交后在Luminex分析仪上读 取，属于一种液体基因芯片技术。实验