大鼠骨髓内皮祖细胞SPIO标记和检测.pdfVIP

山西医科大学硕士学位论文 大鼠骨髓内皮祖细胞 SPIO 标记及检测 中文摘要 背景：一些研究者利用超顺磁性氧化铁对血管内皮祖细胞进行标记，但是，对于超顺磁性 氧化铁标记血管内皮祖细胞后，对其存活、增殖及凋亡是否有影响研究较少。 目的： 研究大鼠骨髓内皮祖细胞 (endothelial progenitor cells，EPCS)的分离、培养、 SPIO 标记，SPIO 对 EPCS 的标记效果及其对细胞存活、增殖以及凋亡的影响，为进一步实 验研究奠定基础。 方法： SD 大鼠体重 120g 150g，采用梯度密度离心法和贴壁法获取大鼠 EPCS，采用 25 μ ~ g ／mL SPIO 对其标记，比较标记和未标记的 EPCS：普鲁士蓝染色观察铁标记率；台盼蓝 检测细胞活力；MTT 法检测细胞增殖活力；Calcein-AM ／PI 染色检测细胞活性及细胞膜完 整性；AO ／PI 染色检测细胞凋亡率。 结果与结论： 分离培养 EPCS7 10 d，细胞集落相互连接，呈典型的铺路石样外观。普鲁 ~ 士兰染色显示 SPIO （25 μg/mL，24 h）对细胞的标记率接近 94％；比较 SPIO 标记及未标 记的 EPCS：细胞活力分别为 94.34%±0.25%和 95.33%±0.31%；MTT 法检测两组间相比差 异无统计意学义 (P0.05)；Calcein-AM/PI 染色检测细胞的活性和膜完整性，存活率分别 为 96％和 97％；AO/PI 染色两组细胞的凋亡率均为 5％。采用梯度离心法从骨髓中分离单 个核细胞，经诱导培养可实现内皮祖细胞的分离培养；25 μg/mL 浓度的 SPIO 细胞标记率 高，对细胞毒性小，且不影响 EPCS 的活力、增殖及凋亡。 关键词： 内皮祖细胞； 骨髓； 超顺磁性氧化铁颗粒 ；标记 - II - 山西医科大学硕士学位论文 Rat bone endothelial progenitor cells labeled with superparamagnetic iron oxide particles and the detection Abstract Obiective To study the rat bone marrow progenitor cells (endothelial progenitor cells, EPCS) the isolation, culture, SPIO mark, and observe whether there is any effect on cellular viability、 proliferation and apoptosis. which lay the foundation for futu