对急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡机制的实验探究.pdfVIP

目 录 对急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡机制的实验研究……………………….1 中文摘要………………………………………………….…………………………1 ABSTRACT………………… ………………………………………………………3 英汉缩略词对照表………………………………….………………………………7 前言…………………….……………………………………………………………8 1 材料与方法 …………………………………………………………………… 10 1.1 实验材料与仪器………………………..………………………….……………11 1.2 主要实验试剂…………………………………………………….…………… 11 1.3 主要实验仪器………………………………………………………………… 11 1.4 实验方法 ……………………………………………………………………… 11 1.5 统计方法……………………………………………………………..………… 19 2 结果 ………………………………………………………………………………19 2.1 建立胰腺炎大鼠模型中胰腺组织病理改变…………………………………19 2.2 梗阻型胰腺炎模型各组大鼠胰岛细胞凋亡情况………………………………20 2.3 乌司他丁、善宁联合用药对急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡干预 …………………………...……………..…………………………………………...20 3 讨论 ………………………….…………………………………….…………… 22 3.1 胰腺动物模型建立的关键点……………………………………………………22 3.2 梗阻型胰腺炎模型时大鼠胰岛细胞凋亡……………………………………...24 3.3 药物干预后大鼠胰腺细胞凋亡情况…………………………….….………26 4 结论 ……………………………..……………………………………………… 27 参考文献……………………………………………………………………..………28 综述………………………..……………………………………………………..… 32 攻读学位期间发表的文章目录…………………………………...………….…… 39 致谢……………………………………………………………………………… 40 对急性梗阻性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡机 制的实验研究 中 文 摘 要 目的：观察急性梗阻性胰腺炎(acute obstructive pancreatitis,AOP) 大鼠胰腺细胞凋亡的发生规律及其内分泌的变化以及大鼠在乌司他 丁、善宁干预后，大鼠胰腺细胞凋亡的发生规律及其内分泌的变化。 方法：1.采用胆胰管结扎方法建立AOP 大鼠模型梗阻8 小时8 只， 梗阻 12 小时4 只，待8～12 小时后松开活结，使梗阻胆管畅通，对 照组 10 只麻醉后开腹，翻动胃和十二指肠后关腹。麻醉苏醒后自由 饮水进食后观察 72 小时，取血检测胰岛素和胰高血糖素以及血清淀 粉酶的水平；取胰腺组织，采用TUNEL 法与Real-Time-PCR Bax 检 测胰腺细胞凋亡情况。2.乌司他丁、善宁联合用药对急性梗阻性胰腺 炎大鼠胰腺细胞凋亡干预的实验研究，将采用胆胰管结扎方法建立A OP 大鼠模型分为①乌司他丁预处理组②善宁预处理组③乌司他丁+ 善宁联合预处理组④梗阻性胰腺炎对照组，建立大鼠模型24 小时后， 取血检测胰岛素和胰高血糖素以及血清淀粉酶的水平；取胰腺组织， 采用TUNEL 法与Real-Time-PCR Bax 检测胰腺细胞凋亡情况。结果： 1.采用胆胰管结扎方法建立AOP 大鼠模型，AOP 大鼠在8h、12h 时 点的血清淀粉酶为（1198±687 ） U/l 与 （1698±1103）U/l 、胰岛素 （8.1 ±5.8 ） ng/ml 与（12.7±6.9 ） ng/ml 和胰高血糖素水平（6.8 ±4.6 ） ng/ml 与（7.3 ±2.9 ）ng/ml ；显著高于假手术对照组的（404 ±222 ）U/l （5.6 ±2.7 ）ng/ml 和（2.6 ±2.1 ）ng/ml （P0.05 ），胰腺 组织在外分泌部分腺泡细胞与内分泌部分胰岛细胞均发生凋亡，8h、 12h 的细胞凋亡率分别为（20.5 ±11.2）%与（1