槐耳清膏对结肠癌SW480细胞生长抑制作用和其机制研究.pdfVIP

实验结果…………………………………………………………………………¨9 讨论…………………………………………………………………………………………………………11 结论…………………………………………………………………………………………………………13 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………14 五、参考文献…………………………………………………………………………15 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………l6 在学期间科研成绩………………………………………………………………25 致谢………………………………………………………………………………26 个人简介…………………………………………………………………………27 ·中文论著摘要· 槐耳清膏对结肠癌SW480细胞生长抑制作用及其机制 研究 刖 吾 结肠癌是在我国发病率及病死率较高消化系统恶性肿瘤，近年来，城市人口 结肠癌发病率比lO年前上升1／3，农村上升9％。早期诊断率只有11％～15％， 80％以上患者确诊时已属中晚期，如能早期发现、治疗，术后5年生存率可达90 ％以上，而晚期结肠癌五年生存率低于20％。尽管结肠癌的治疗方法不断改进， 但是仍然不能达到满意的效果，大多数的病人由于局部复发和转移扩散在短时间 内死亡。结肠癌之所以预后不良主要是因为在疾病发展过程中入侵周围的组织结 构并扩散到远处器官，目前，结肠癌的生物学特点仍不能完全了解。 结肠癌的发生是一个多基因参与、多阶段发展的复杂过程，是环境因素与基 因交互作用的结果。各种致癌因素引起细胞内多种基因的变化，从而在细胞粘附、 信号传导、血管发生等多方面促进了肿瘤的发生和演进。 研究结肠癌的治疗具有重要的临床意义，中药在恶性肿瘤治疗中发挥着不可 忽视的作用，槐耳清膏是槐栓菌质发酵后的热水提取物，其味苦辛，性平无毒，具有 “治风”、“破血”、“益力”之功效，近来发现它能抑制实体肿瘤的血管生成。有研究 证明金克槐耳能诱导直肠癌细胞凋亡，但其作用机制尚不明确。早在1971年 Folkman首次提出“肿瘤的生长和转移依赖于新生血管形成”的观点，血管内皮生长 endothelial 因子(vascular growthfactor,VEGF)是促进血管形成，增强血管内皮细胞 增殖和迁移能力的重要介质。 虽然抑制肿瘤血管新生早已成为当前抗肿瘤治疗热点之一，但金克槐耳是否 具有抗结肠癌新生血管生成的作用尚未见文献报道。本研究以人结肠癌SW480细 endothelial 胞株为对象，研究缺氧条件下槐耳清膏对血管内皮生长因子(vascular inducible factor-1a， factor,VEGF)及其调节基因缺氧诱导因子la(hypoxia growth HIF．1a)的抑制作用，初步探讨槐耳清膏在抑制肿瘤新生血管形成方面的作用机 制，为结肠癌临床治疗提供新的理论和实验依据。 方 法 l、细胞培养 2、MTT法 3、RT-PCR法 4、WesternBlot法 本实验先进行MTT法，之后体外培养人结肠癌SW480细胞48h，随机分为 1640培养基含槐耳清膏，分别进行RT-PCR法和WesternBlot法。 结 果 1、槐耳清膏对SW480细胞抑制率随药物浓度增加而上升，lmg／ml时抑制率 最大(66．53％)，与5-FU组(浓度为10I_tg／m1)相比无统计学意义。 2、HH组和HC组VEGF、HIF．1amRNA表达水平均显著高于NC组(VEGF VS．