过氧化物酶体增殖物激活受体γ对大鼠脊髓损伤神经保护作用和机制的实验研究.pdfVIP

过氧化物酶体增殖物激活受体丫对大鼠脊髓损伤神经保护 作用及机制的实验研究 研究生：王法臣 专业：外科学 导师：袁绍纪教授 中文摘要 神经保护是指在神经损伤发生前或神经损伤早期采用药物治疗或某些处理措施将 神经的损伤降低到最低程度的一种治疗策略。脊髓损伤防治涵盖的内容较广，涉及继发 损害的防治、亚急性／慢性阶段的神经保护、轴索／神经元的持续再生以及神经再支 配的获得，每一部分又包含着若干亟待解决的课题。近20年来国内外学者对脊髓损伤的 生物学机制进行了大量的实验和临床研究，已经在细胞水平和分子水平对脊髓损伤机 制有了更深入的了解。在此基础上研究者致力于寻求新的神经保护治疗手段，以求改 cord 善脊髓损伤的预后。脊髓损伤(spinalinjury，SCI)后自身的修复能力非常有限，死亡 的神经元不能由自身产生的神经元或邻近的神经元来代替．目前临床治疗主要是控制 继发性损伤的进一步加重．如何有效地促进损伤脊髓的再生与修复一直是神经科学领 stem 域的难题。近年来神经干细胞(neuralcells,NSCs)的研究改变了这一观点，神经于 细胞作为一种全能细胞能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等神经系统的 各种成分，有效的促进脊髓的再生与修复。神经干细胞治疗脊髓损伤作为一种与传统 有别的神经保护及修复的重要防治手段近年来已开始越来越多地引起人们的兴趣和关 注，成为神经科学研究领域中的一个热点。研究发现过氧化物酶体增殖物激活受体Y activated proliferatorreceptory,PPAR7)的激活能促进神经干细胞细胞的 (peroxisome 分化和成熟【¨，在中枢神经系统的损伤治疗方面治疗有良好的研究前景。目前PPARy 对脊髓损伤后神经保护的研究尚处于初级探索阶段。本实验采用SD大鼠脊髓打击损伤 模型，探讨PPAR7在大鼠脊髓损伤后继发性损伤中的表达变化规律，及高压氧预处理 对其表达变化的影响，观察PPAR7对脊髓损伤的神经保护效应，并对保护机制进行初 步探讨，同时对高压氧及PPAR7激动剂联合治疗脊髓损伤的疗效给予评估。本文共分 为以下四部分内容： 一．PPAR?在大鼠脊髓损伤后继发性损伤中的表达变化规律及高压氧预处理对其表达 变化的影响 目的 通过建立脊髓损伤和高压氧预处理脊髓损伤动物模型，观察PPAR7在大鼠脊髓损 伤后继发性损伤中的表达变化规律，及高压氧预处理对其表达变化的影响。 方法 1、高压氧预处理动物模型的建立：成年清洁级雄性大鼠随机分为3组后，高压氧 预处理组利用实验动物高压氧舱，预处理5天。 2、脊髓损伤模型的建立：麻醉状态下，手术显露椎管及硬膜囊，用309冲击棒 自5cm高度自由落体下坠致伤脊髓。冲击棒下端直径3mm，致伤能量为1509cf, 建立脊髓损伤模型。 3、观察项目： PPARTmRNA和蛋白的定量观察。 4、实验内容数据采用SPSSl6．0软件进行统计学处理。 结果 l、本实验高压氧预处理及大鼠脊髓打击伤模型建立可靠稳定，具有较好的可重复 性。 比较有统计学差异。3d至7d内表达明显增加，至14d时为本实验观察时间点的表达 高峰，为2．05±0．31。28d时表达明显回落，与对照组比较已无统计学意义。 3、高压氧预处理大鼠脊髓损伤后ld PPART表达与损伤组比较明显增加，有统计 已明显回落，但仍有统计学意义。 结论 1、大鼠打击SCI模型与人类SCI有一定相似性，个体差异不明显，模型制备简 单，稳定重复性强，高压氧预处理模型与人类高压氧治疗具有一定相似性，可稳定重复。 2、脊髓损伤后PPARy表达明显增加，并能在较长时间内保持高表达。 3、在本实验条件下，高压氧预处理明显促进了PPA脚的表达，高表达时间明显 延长。 二．PPARy对大鼠脊髓损伤后神经保护效应的实验研究 目的： 观察PPAR7的激活对成年大鼠急性脊髓损伤后不同时期神经功能的影响，以探