钙结合蛋白S100A9在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达和意义.pdfVIP

目 录 1 钙结合蛋白 S100A9 在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达及意 义…………………………………………………………...…1 1.1 中文摘要……………………………………………………3 1.2 英文摘要……………………………………………………...…5 1.3 前言…………………………………………………………...…7 1.4 材料与方法………………………………………………….…11 1.5 结果………………………………………………………….…17 1.6 讨论………………………………………………………….…25 1.7 结论………………………………………………………….…30 1.8 参考文献…………………………………………………….…31 1.9 英汉缩略词对照表………………………………………….…34 2 致谢………………………………………………………….…35 3 综述…………………………………………………………….36 2 钙结合蛋白 S100A9 在小鼠铜绿假单胞菌肺炎中的表达及意义 摘 要 目的 ：观察小鼠铜绿假单胞菌肺炎肺组织中 钙结合蛋白 S100A9mRNA 表达，并同时测定对应小鼠血液中 S100A9 钙结合蛋 白含量，观察肺组织的病理改变，探讨钙结合蛋白 S100A9 在铜绿假 单胞菌所致小鼠肺部感染中的地位与作用。方法：小鼠 36 只，按随 机数字表分为空白对照组 12 只、模型组小鼠 24 只。通过经环荚膜穿 刺注射铜绿假单胞菌菌液建立肺部感染模型。空白对照组（经环荚膜 8 注射等量的 2 个麦氏单位浓度（6×10 cfu/ml ）0.6ml 的铜绿假单胞菌 菌液，造模过程中死亡 2 只）、模型组（经环荚膜注射等量的 2 个麦 氏单位浓度的铜绿假单胞菌菌液0.6ml，造模中死亡 5 只,分别在在 3 小时和 9 小时 2 个时间点各处死 9 和 10 只）。取小鼠右肺下叶 HE 染 色观察肺组织病理，观察空白对照组，3h 模型组及 9h 模型组的病理 改 变 ； 使 用 普 通 PCR 检 测 系 统 对 三 组 小 鼠 肺 组 织 中 S100A9mRNAPCR 反应进程中的产量进行实时监测,最终对实验数据 进行分析,从而比较三组小鼠 S100A9mRNA 表达，并同步采用双抗体 夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别测定三组小鼠血液中 S100A9 以及TNF-a 的含量，比较三组小鼠血液中生成 S100A9 钙结合蛋白的 差异及与 TNF-a 变化的相关系。结果：（1）病理观察：大鼠右下肺 肺组织 HE 染色 200 倍光镜下病理结果显示，正常对照组（1 组）肺 泡结构较为均匀与清晰，有少许淋巴细胞与巨噬细胞侵润；模型组（3h 组）主要为肺泡炎性改变，肺泡内及周围可见渗出，中性粒细胞和淋 3 巴细胞，巨噬细胞浸润;模型组（9h 组）肺泡炎性最严重，肺泡内及 周围可见大量渗出，大量中性粒细胞和淋巴细胞，巨噬细胞浸润，病 理炎性改变明显重于 3h 组。（2 ）普通PCR 实验: 本实验根据电泳后 条带亮度的强弱来判断模板拷贝数的高低，或者是表达量的高低。实 验结果得出 s100A9mRNA 在第 3h，9h 组中的条带亮度强度明显高于 空白组，提示 S100A9 表达量模型组明显高于对照组,且经统计分析后 3h 与对照组差异具有统计学意义（p0.05) ，与9h 模型组比较（P0.05 ） 差异有意义。（3 ）S100A9 钙结合蛋白 ELISA 检测：结果显示 3h， 9h 组外周血中 S100A9 的含量明显高于空白组，且以 3h 组增高最明 显，3h 组与空白组比较差异具有统计学意义（p0.05 ）与 9h 组比较 （P0.05 ）有差异。（4 ）肿瘤坏死因子TNF-a 的ELISA 检测结果显 示：3h，9h 组外周血中 TNF-a 的含量明