高压氧对单层Caco-2细胞缺血再灌注损伤的紧密连接的作用.pdfVIP

·中文论著摘要· 高压氧对单层Caco．2细胞缺血再灌注损伤的 细胞间紧密连接的影响 ， 。 目 的 如何预防和阻止脏器缺血／再灌注(I瓜)损伤，尤其是肠道I／R损伤，是临床 治疗重度创伤／失血性休克(1mS)、感染性休克、胸腹主动脉瘤手术和脏器移植 中减少和降低系统性炎症反应综合征(S瓜S)和多器官功能不全综合征(MODS) 。的重要课题。研究高压氧干预治疗、维持肠道有氧代谢和预防其I／R损伤的机制 和治疗方案是创伤、血管外科、脏器移植领域崭新的课题。本实验应用单层人类， 大肠粘膜上皮细胞Caeo．2建立离体肠道缺血再灌注损伤模型，研究高压氧对缺血 再灌注损伤中肠道上皮通透性和肠道上皮细胞问紧密连接结构蛋白转录水平的影 响，探讨高压氧干预的机制，以及可能为临床治疗和预防肠道I／R损伤提供一种 新的、安全和有效的治疗方法。 方法 分别在transwell系统上和六孔细胞培养皿内培养单层人类大肠粘膜上皮细胞 Caeo-2，应用0．5raMt-BuOOH诱导离体肠粘膜上皮细胞缺血／再灌注损伤，40个 承有单层Caeo一2细胞的嵌套膜系(培养孔)统随机分为五组(每组8例)i对照 价肠道粘膜上皮细胞问紧密连接的开放程度。用RT-PCR检测细胞问紧密连接组 transwell嵌套系统本身的电阻值以下标记为BL-trans组)。 结果 检测TEER结果显示N组阻值最高，其次HBO．P组，再次HBO．R组，最后 1 不具备统计学差异(，O．05)。 结论 I／R损伤可导致单层Caco．2细胞TEER明显降低，通透性明显增加， ZO．ImRNA含量明显降低，TJ蛋白骨架ZO．1减少，提示细胞间TJ开放严重。 高压氧干预显示出保护单层Caeo-2细胞TJ功能作用，阻止TEER降低，抑制TJ 开放，机制可能与增加细胞ATP、恢复有氧代谢，维持TJ的骨架蛋白ZO．1有关。 缺血期前和再灌注期给予高压氧干预治疗显示有益结果，高压氧预处理效果更佳。 缺血期给予高压氧使单层Caco-2细胞问TJ开放更明显，跨膜电阻抗阻值甚至低 于I／R组，提示此期高压氧干预无效，甚至加重损伤。 关键词 2 ·英文论著摘要· of on of Theeffects oxygentightjunction hyperbaric Caco--2cellsin injury monolayer ischemia-—reperfusion ective Obj Itis811 issuetoreducethe inflammatory，responsesyndrome important systemic treatmentof theclinical organdysfunctionsyndrome(MODS)in (SIRS)andmultiple severe ofthoracoaMominal shoeLsurgery