舒郁胶囊对抑郁情绪模型大鼠不同脑区5-HT3B受体分布与表达地影响.pdfVIP

目 录 引 言1 材料与方法3 1 材料3 1.1 实验动物3 1.2 药品及试剂3 1.3 仪器及器材3 1.4 相关溶液配制4 1.4.1 0.1m ol/L PH 7.4 PB 缓冲液的配制4 1.4.2 0.01m ol/L PH 7.5 PB S 缓冲液的配制4 1.4.3 4％多聚甲醛固定液的配制4 1.4.4 0.01m ol/L PH 6.0 柠檬酸缓冲液的配制4 1.4.5 5-H T3B 多克隆一级抗体 （一抗）稀释液的配制 4 1.4.6 FITC 标记山羊抗兔 IgG （二抗）稀释液的配制4 1.4.7 碘化丙啶 （PI）的配制4 1.5 玻片处理4 1.5.1 载玻片的处理4 1.5.1.1 清洗4 1.5.1.2 多聚赖氨酸处理5 1.5.2 盖玻片的处理5 2 方法5 2.1 大鼠模型制备5 2.1.1 慢性温和应激 （CM S）造模方法[12-14]5 2.1.1.1 实验动物饲养条件及分组5 2.1.1.2 应激设计5 2.1.1.3 应激操作5 2.1.2 给药条件7 2.1.3 旷场实验[16]7 2.1.4 糖水偏好实验[13-14]7 2.2 大鼠脑组织取材7 2.3 石蜡切片制备8 2.3.1 洗涤8 2.3.2 脱水8 2.3.3 透明8 2.3.4 浸蜡8 2.3.5 包埋8 2.3.6 切片8 2.4 免疫荧光化学反应9 2.4.1 石蜡切片脱蜡至水9 2.4.2 微波热抗原修复[18]9 2.4.3 封闭9 2.4.4 一抗孵育9 2.4.5 二抗孵育10 2.4.6 碘化丙啶 （PI）孵育10 2.4.7 封片10 2.5 检测及数据分析10 2.6 统计方法10 结 果11 1 宏观指标结果11 1.1 各组大鼠体质量比较11 1.2 各组大鼠糖水偏好值比较11 1.3 各组大鼠旷场实验行为学得分比较12 1.4 大鼠宏观表现观察13 2 免疫荧光检测结果13 2.1 各组大鼠不同脑区 5-HT3BR 的定位分布13 2.2 各组大鼠海马 CA 1 神经元形态的变化16 2.3 各组大鼠额叶、顶叶皮质、海马、下丘脑 5-HT3BR 受体阳性细胞相对荧光强 度比较16 讨 论19 1 情志病证与抑郁19 1.1 情志病证的概述[19]19 1.2 抑郁情绪与情志病症20 1.3 抑郁情绪的发病机理20 1.3.1 心理、社会因素20 1.3.2 个体身心差异因素21 1.3.3 神经介质-神经内分泌系统平衡失常的几种假说 21 1.3.3.1 抑郁症去甲肾上腺素 （N E ）功能学说： 21 1.3.3.2 多巴胺 （D A ）代谢功能障碍假说：21 1.3.3.3 5-羟色胺 （serotonin，5-H T ）功能学说：21 2 与情绪关系密切的脑区22 2.1 额叶、顶叶皮质22 2.1.1 额叶、顶叶皮质的结构功能22 2.1.2 额叶、顶叶皮质与抑郁情绪的关系23 2.2 海马23 2.2.1 海马及其周围结构及功能[40] 4[1]23 2.2.2 海马与情绪的关系24 2.3 下丘脑25 2.3.1 下丘脑的结构及功能25 2.3.2 下丘脑与情绪的关系25 3 抑郁情绪模型大鼠的造模及评价26 3.1 慢性温和应激法制备抑郁大鼠模型26 3.2 体质量测量结果分析27 3.3 糖水偏好实验结果分析27 3.4 旷场实验和宏观行为药理学结果分析27 4 5-H T3R 及其与抑郁情绪的关系28 4.1 5-H T3R 的结构29 4.2 5-HT3R 在脑内的分布29 4.3 5-H T3R 与抑郁情绪的关系30 4.3.1 5-H T3R 与单胺类神经递质30 4.3.2 5-H T3R 与 γ-氨基丁酸31 4.3.3 5-H T3R 拮抗剂与抑郁情绪31 5 问题与展望32 5.1 抑郁情绪造模方法及其评价32 5.2 舒郁胶囊有效成分对抑郁治疗作用的机制33 结 语34 参考文献35 综 述40 致