山奈酚诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2凋亡的实验探究.pdfVIP

山奈酚诱导人鼻咽癌细胞株CNE一2凋亡的实验研究， 中文摘要 【目的】 山奈酚(Kaempfer01)主要是从姜科植物山奈的根茎中提取的一种具有抗癌 作用的化学活性物质，本实验通过研究山奈酚对人鼻咽癌细胞株CNE．2的增殖、 凋亡及细胞周期的影响，并探讨其分子作用机制，旨在为鼻咽癌的多模式治疗拓 展新的植物化学药物治疗提供实验资料。 【方法】 (1)体外培养人鼻咽癌细胞CNE．2，MTT比色法检测山奈酚对CNE一2细胞 增殖的影响。(2)倒置相差显微镜及荧光显微镜观察CNE．2细胞凋亡形态学变 ladder检测细胞 化。(3)流式细胞术(FCM)PI染色法检测细胞凋亡。(4)DNA blot B1蛋白的表达。 检测Ba)【、Bcl．2、P53、P2l及Cyclin 【结果】 的增大，细胞活力逐渐下降，并呈现剂量和时间依赖效应。(2)不同浓度的山奈 学意义(K0．01)。(3)不同浓度的山奈酚处理CNE-2细胞48后，光镜下显示细胞 逐渐变圆，体积变小，细胞膜皱缩，胞质浓缩，细胞内颗粒增多；荧光染色显示 胞核固缩碎裂，呈大小不等的不规则块状、圆形或花瓣状，出现典型的细胞凋亡 形态学变化。(4)山奈酚处理CNE．2细胞72后能以剂量依赖的方式诱导CNE．2细 胞产生凋亡。其中，山奈酚40、60、80、100|lmol／L浓度组作用CNE．2细胞72h 显示，60umol／L及以上浓度组均出现明显“梯状”条带。(6)流式细胞仪分析 显示：不同浓度山奈酚处理CNE．2细胞24h后，与对照组相比，GI期细胞减少，S 期及G2期细胞增多，说明山奈酚能影响CNE．2细胞周期，使细胞停滞于S期及G2 期，有利于细胞DNA的合成但阻止细胞分裂；药物处理CNE．2细胞72h，仅能阻 加，Bcl．2蛋白表达下降；不同浓度山奈酚处理CNE．2细胞48h，P21蛋白表达增 B1蛋白表达下降。 加，Cyclin 【结论】 (1)山奈酚体外具有对人鼻咽癌CNE．2细胞增殖的抑制作用，并具有时间和 剂量的依赖性。 (2)山奈酚以浓度依赖的方式诱导CNE．2细胞凋亡；山奈酚可能通过抑制 Bcl．2蛋白表达，诱导Bax蛋白表达、活化，诱导产生经线粒体内源性途径的凋亡。 (3)山奈酚能诱导CNE一2细胞产生G2期阻滞；山奈酚可使P53蛋白表达增加， B1的活性，这可能是其 进而促进细胞周期抑制蛋白P21的表达，从而抑制Cyclin 产生细胞周期阻滞的途径。 (4)山奈酚可诱导CNE．2细胞产生细胞周期阻滞，抑制其增殖，并诱导其凋 亡，有望成为一种极具前景的抗鼻咽癌药物。 【关键词】 Bl： 2 on inHuman CarcinomaCe¨Line StudyApoptosis Nasopharyngeal CNE一2Induces Bykaempferol Abstract 【Objective】 isakind is isolatedf如m Kaempferol of肌ticarcinogen，whichmainly of onthe rhizome．HercweeValuatethee仃ects galaIlgal kaempferol Kaempferia andcell