脑缺血再灌注后IL-10干预对IRF-1表达的作用.pdfVIP

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脑缺血再灌注后IL-10干预对IRF-1表达的作用

脑缺血再灌注后IRF.1的变化以及IL.10干预对其表达的影 响 硕士研究生:刘德山 导 师:刘楠教授 中文摘要 目的:探讨IL.10抑制脑缺血再灌注免疫炎性反应的内在分子机制,通过在体外 缺氧复氧法建立脑微血管内皮细胞(BMEC)和中性粒细胞(PMN)共培养脑缺 血再灌注模型,并与造模成功后应用IL.10进行干预,通过观察干扰素样调节因 子一1(interferonregulatory 制,为IL.10治疗脑缺血性疾病及其机理提供实验依据。 方法: 1、贴壁法分离、培养、纯化rBMECtll并通过免疫组织化学法检测第VIII因子相 进行鉴定;3、通过MTT检测检测两种细胞不同缺氧共培养时间以及不同IL.10 干预溶度对细胞生长曲线的影响;以确定最适的缺氧培养时间以及IL.10干预溶 度;3、实验分为模型组(未用IL.10干预)、正常组(两种细胞正常共培养)、 然后分别通过逆转录PCR(1mPCR)法和WesternBlot法检测IRF.1表达情况。 结果: 1、缺氧复氧法建立脑微血管内皮细胞(BMEC)和中性粒细胞(PMN)共培养 模型,IRF.1较正常组表达明显升高。 2、造模成功后应用IL.10干预,IRF.1表达下降,并与IL.10剂量有关,随干预 剂量的增加而IRF.1下降明显,至30ng/ml达到最低。 低于模型组,并组间于IL.10干预剂量的不同而存在差异,差异具有统计学意义 (P0.05)。 结论:脑缺血再灌注后IL.100--/通过抑制致炎因子IRF.I的表达,可能是其发挥脑 保护作用之一,为IL一10临床治疗脑血管疾病提供了实验依据。 关键词:脑微血管内皮细胞中性粒细胞 血脑屏障炎性损伤IRF-I 6 EffectsinterventionIL--10onIRF-—1aftercerebral ofthe by - - - - 一 |schemia-reperlUslon de-shah Postgraduate:Liu LiuNan Tutor:Professor Abstract of and to theinternalmolecularmechanism obiectexplore immunological cerebral inhibited reactioninduced inflammatory by ischemia-reperfusionby IL一1 modelwasestablished brain 0;Cerebral CO-culturing ischemia-reperfusion microvascularendothelial neutrophils(PMN) cells(BMEC)andpolymorphonuclear and withIL-10 inthe invitro inte

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