重组腺病毒携带p53联合抗癌药物对间皮瘤的抗肿瘤效果探究.pdfVIP

V1 目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文 重组腺病毒携带p53联合抗癌药物对间皮瘤的抗肿瘤 效果研究 前言…………………………………………………………………8一 刖吾………………………………………………………………… 材料与方法…………j……………………………………………．．9 结果…………………………………………………………………14 附图…………………………………………………………………16 附表…………………………………………………………………22 讨论…………………………………………………………………23 结论…………………………………………………………………25 参考文献……………………………………………………………27 综述 重组腺病毒p53基因治疗肿瘤的可行性及研究进展………32 致谢………………………………………………………………………42 个人简历…………………………………………………………………43 中文摘要 重组腺病毒携带p53联合抗癌药物对间皮瘤的 抗肿瘤效果研究 摘 要 目的：恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural 一种源于胸膜间皮细胞、以局部侵袭为主、恶性度较高的罕见疾病。大多 数恶性间皮瘤由石棉类物质的过多接触引起。尽管现在有很多治疗手段， 但仍然是一个棘手的病症。它的潜伏期很长，目前也没有可行的预防手段。 未来数十年中，在很多工业化国家及新兴发展中国家中病人的数量会持续 攀升。胸膜切除术是一个仅适用于早期患者的治疗选择，但根治术后仍经 常复发。间皮瘤对放射治疗拮抗，因此仅在姑息疗法时使用。因此对大多 是目前一线的治疗方案。然而，联合顺铂和培美曲塞的治疗方案平均生存 期仅为12．1个月，且预后差。因此需要有一个新的治疗方案来提高病人 的预后和生活质量。 为治疗基因，检测是否会抑制间皮瘤细胞的生长，以及Ad—p53与顺铂或 培美曲塞联用是否产生抗肿瘤效果。结果显示Ad．p53进行间皮瘤转导， 细胞周期分析显示出增加的G0／G1期比例以及sub．G1期比例，主要取决 体外实验Ad．p53转导抑制了间皮瘤细胞 于细胞类型和Ad．p53的剂量； 活性并以协同的方式，增强了顺铂或培美曲塞的抑制效应；胸腔内注射 Ad．p53和顺铂全身给药在原位动物模型产生出抗肿瘤效果。这些数据共 间皮瘤的方法。 1 NCI．H226，NCI．H28及MSTO．2 导对此5种间皮瘤细胞系的增殖抑制效果。使用流式细胞周期分析方法检 中文摘要 测Ad．p53对细胞周期变化的影响。以Westernblot方法研究Ad—p53转导 联合用药产生协同的癌细胞抑制作用。最后又运用动物体内实验，检测 Ad．p53和CDDP的联合抗肿瘤效果。 结果： 1MTT分析结果 NCI．H28、NCI．H2452、NCI．H226和MSTO．211H间皮瘤细胞的生长， 和MSTO．21 部分原因可能是Ad受体的低表达水平。 2流式细胞周期分析结果 Ad．p53感染间皮瘤细胞系MSTO．21 MSTO．21 sub．G1的增加。与MSTO。21 敏感性。 ． 3蛋白质印迹分析结果 Phos．Rb的下调，相当于从磷酸化状态到非磷酸化状态的转换。以上数 据共同表明Ad-p53激活了p53介导的分子传导通路； 3．2在MSTO．21 平保持不变，t-Bid在两种细胞中均未检测到。这些数据共同表明Ad．p53 转导通过caspase．8激活了的死亡受体介导的外源性凋亡通路，但通过 easpase．9线粒体介导的内源性凋亡通