带菌嫁接工具对西瓜嫁接苗BFB发生影响及防治方法.docVIP

带菌嫁接工具对西瓜嫁接苗BFB发生影响及防治方法摘 要： 细菌性果斑病（BFB）是西瓜上的毁灭性病害，西瓜嫁接苗集约化生产过程中容易感染该病害，研究嫁接过程中BFB的侵染途径及防治方法对于西瓜健康种苗生产具有重要意义。本研究通过人工模拟接种西瓜细菌性果斑病菌pslbtw20，分析了用带菌竹签嫁接对西瓜嫁接苗BFB发生的影响，同时研究了不同消毒技术的效果。结果表明，高浓度菌源污染的竹签嫁接能够导致嫁接苗BFB的发生，嫁接前采用40% 甲醛50倍液和75% 酒精浸泡带菌嫁接用具15 min，防效可达到100%。 关键词： 嫁接工具； 竹签； 细菌性果斑病； 消毒技术； 西瓜嫁接苗 西瓜细菌性果斑病（Bacterial Fruit Blotch）是由燕麦嗜酸菌西瓜亚种（Acidovorax avenae subsp. citrulli）引起的瓜类细菌性果腐病，简称BFB，是典型的由种子带菌引起的传染性病害，也是我国规定的检疫性病害之一。BFB从苗期到成株期均可发生，病菌可危害瓜类植物的叶子和果实，引起叶枯和瓜腐，但叶柄、茎、根不受浸染[1]。BFB病菌主要附着在种子和病株残体上越冬，种子带菌为主要侵染来源，病菌随风、雨或灌溉水从植株气孔或伤口侵入，在病株上大量繁殖扩展， 造成再次侵染[2]。 BFB于1985年在我国首次被发现，目前该病在我国各西瓜产区均有发生。随着西瓜集约化嫁接育苗技术的普及，越来越多的育苗工厂开始出现BFB的发生与流行。BFB对嫁接苗会造成毁灭性的危害，其所造成的损失和影响远比其他瓜类病害严重。因此，研究嫁接苗生产过程中BFB的侵染途径及其防治方法，对保护瓜农、育苗生产者的利益和防控西瓜BFB的发生与流行具有重要意义。 嫁接过程中嫁接苗的伤口、污染的刀具和器皿及人为的传播均会造成病害的流行[3]。Bahar等[4]发现在甜瓜1叶1心期，茎部人工针刺接种BFB病菌，会导致甜瓜幼苗发生BFB，最终腐烂死亡。在西瓜嫁接过程中，需使用竹签等嫁接工具在砧木上斜插，这也相当于一个接种过程。然而，如果竹签等嫁接工具带有病原菌，会不会造成嫁接苗BFB的发生，目前尚不知晓。本研究的主要目的是利用人工接种的方法，分析用带菌竹签嫁接与西瓜嫁接苗BFB发生的关系，寻找高效嫁接用具消毒技术，旨在为西瓜嫁接苗健康生产提供技术支撑。 1 材料和方法 1.1 供试材料 砧木和接穗分别选用京欣砧1号（北京京研益农科技发展中心提供）和早佳（84-24，新疆明鑫科鸿农业科技有限责任公司提供）。 西瓜细菌性果斑病菌为pslbtw20，由中国农业科学院植物保护研究所赵廷昌研究员惠赠。供试培养基为KBA培养基（硫酸镁1.5 g、磷酸氢二钾1.5 g、琼脂20 g、甘油10 g、蛋白胨20 g、蒸馏水1 000 mL、pH值7.0～7.2）。嫁接竹签由武汉洪北种苗有限公司提供。试验于2012年3月15日至5月1日在华中农业大学校内进行。 1.2 试验方法 1.2.1 药剂室内抑菌和杀菌试验 挑选西瓜细菌性果斑病菌pslbtw20的单菌落，在KBA液体培养基中28 ℃、220 r·min-1培养，制成菌量约为108 cfu·mL-1的菌悬液。分别用40% 甲醛50倍液、75% 酒精进行西瓜细菌性果斑病菌的抑菌和杀菌试验。抑菌作用采用纸碟法进行测定[5]，杀菌效果测定按照赵廷昌的方法进行[6]，处理BFB病菌的时间分别为5、10、15 min。 1.2.2 竹签接菌浓度与西瓜嫁接苗BFB发生的关系 选用浓度为108、107、106、105、104 cfu·mL-1的菌悬液，采用人工蘸取菌悬液的方法对竹签接菌，无菌水为对照。嫁接方法均采用顶插接[7]，嫁接竹签蘸1次菌液嫁接1株西瓜苗，共6个处理，3次重复，每个重复18株。在温室中生长10 d，每天记录嫁接苗发病率，观察嫁接苗发病情况。 1.2.3 确定嫁接苗子叶期发病情况的分级标准 根据嫁接苗发病情况并参考Hopkins and Thompson[8]提出的1～9级分级标准，确定竹签带菌时嫁接苗子叶期发病情况分级标准，用于计算病情指数。 1.2.4 带菌竹签嫁接与西瓜嫁接苗BFB发生的关系 在育苗工厂的嫁接过程中，竹签需要连续嫁接作业，所以有必要模拟带菌竹签在育苗工厂中对嫁接苗的危害情况。选用108 cfu·mL-1左右的菌悬液，嫁接竹签蘸取菌液1次，然后按顺序连续嫁接50株西瓜苗（1个穴盘），重复3次，以不带菌嫁接竹签为对照。每天调查嫁接苗发病率并计算病情指数，病情指数参考Amadi等[9]的计算公式： 1.2.5 带菌竹签消毒技术对西瓜嫁接苗BFB的防治效果 选用108 cfu·mL-1左右的菌悬液，采用人工蘸取菌悬液的方法对竹签接菌，分别用40% 甲醛50