HPLCELSD法测定β内酰胺类抗生素注射剂中精氨酸含量.docVIP

HPLCELSD法测定β内酰胺类抗生素注射剂中精氨酸含量 　 【摘要】 目的 建立高效液相色谱蒸发光散射检测法(HPLCELSD)分析β内酰胺类抗生素注射用制剂中精氨酸的含量。 方法 采用Agilent Zorbax SBC18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱，流动相为0.1%三氟乙酸溶液∶乙腈(80∶20)，流速为0.8ml/min，漂移管温度为45℃，雾化气体压力为3.5bar。结果 供试品中精氨酸与抗生素主药及相关杂质分离良好，在10.27～314μg/ml的范围内呈较好的线性关系(r=0.99986)，在盐酸头孢吡肟中的平均回收率为101.5%，RSD为2.1%(n=9)；在氨曲南中的平均回收率为97.8%，RSD为1.8%(n=9)；在头孢拉定中的平均回收率为95.6%，RSD为1.9%(n=9)。以注射用盐酸头孢吡肟为例进行重复性试验，结果测得含精氨酸均值为37.0%，RSD为1.9%(n=9)，灵敏度试验测得方法的检测限和定量限分别为2和10μg/ml。结论 本法专属、快捷，结果准确，重现性好，可以作为部分β内酰胺类抗生素注射用制剂中添加的活性物质精氨酸的含量测定方法。 【关键词】 β内酰胺类抗生素； 精氨酸； 含量测定； 高效液相色谱法； 蒸发光散射检测器 ABSTRACT Objective To develop an HPLCELSD method for determination of arginine in βlactam antibilotic injection. Methods The column: Agilent Zorbax SBC18 (4.6mm×250mm，5μm); the mobile phase∶0.1mol/L trifluoroacetic acidmethanol (80∶20); the drift tube temperature: 45℃; the pressure of nebulizing gas: 3.5bar. Results Good separation of arginine and main related substances could be achieved. The standard curve was rectilinear in the range of 10.27～314 μg/ml (r=0.99986). The average recovery in cefepime hydrochloride was 101.5% and RSD was 2.1% (n=9). The average recovery in aztreonam was 97.8% and RSD was 1.8% (n=9). The average recovery in cefradine was 95.6% and RSD was 1.9% (n=9). The limit of detection and quantification was 2μg/ml and 10μg/ml respectively. Conclusion The method is simple and rapid, the results are accurate and reproducible, and the method could be used for analysis of arginine in βlactam antibilotic injection. KEY WORDS βLactam antibilotic; Arginine; Determination; HPLC; ELSD 目前已上市或申请上市的部分β内酰胺类抗生素注射用制剂中常添加有碱性助溶剂(主要是碳酸钠或碳酸氢钠和精氨酸两大类)，以便临床应用中配制注射液时能够提高药物分子结构中酸性基团的解离程度，增强药物的水溶性。针对目前 中国 药典对含助溶剂的β内酰胺类抗生素注射用制剂的质控现状及国外药典对同类抗生素注射用制剂的质控 发展 趋势，认为应建立对所含助溶剂含量进行准确测定的方法，以考察所含助溶剂对制剂中主药质量(比旋度、纯度和有关物质)和稳定性的影响。为进一步提高我国药典对该类抗生素制剂质量标准控制水平提供 科学 、全面的评价依据，本文选择以精氨酸为检测对象进行研究。 由于精氨酸在紫外区缺乏特征性吸收，故部分含精氨酸的药物制剂其现行国家标准一般采用柱前衍生化法、或用强极性的二醇基柱(也有部分标准采用十八烷基硅烷键合硅胶柱加离子对试剂)以紫外末端吸收波长(通常为200～206nm)进行检测的HPLC法对