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不同品种葛根中葛根素及总黄酮含量测定
不同品种葛根中葛根素及总黄酮含量测定
作者:王言才 段金廒 华永庆 宿树兰
【摘要】 目的建立不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定方法。方法采用RP-HPLC法,以甲醇-水(32∶68)为流动相,检测波长为250 nm测葛根素含量;紫外分光光度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量。结果葛根素峰分离度提高,峰形改善;葛根素0.204~2.04 μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),回收率为98.7%(n=5),精密度RSD=0.86%。总黄酮浓度在4.08~16.32 μg/ml范围内与吸收度线性关系良好(r=0.999 8)。结论该法灵敏、准确、简便易行,重复性好,可用于中药葛根药材及饮片的质量控制。
【关键词】 柴葛 粉葛 葛根素 总黄酮 高效液相色谱
Abstract:ObjectiveTo study the determination method of puerarin and isoflavones in Pueraria lobata (Willd)Ohwi and Pueraria thomsonii Benth. MethodsThe separation was performed on RPHPLC with a mobile phase of CH3OH-H2O (32∶68V/V) solution and the detection wavelength was 250 nm for the determination of Pueraria. UV-spectrophotometry for the determination of isoflavones.ResultsPuerarin and other peaks were separated well and the peak shape was presented well. There was a good linearity within the range of 0.204 to 2.04 μg of Puerarin (r =0.999 9). The average recovery was 98.7 %(n=5). The RSD was 1.3% .The isoflavones had a good linearity within the range of 4.08~16.32 μg/ml(r=0.999 8).Conclusion This method is sensitive, accurate and reproducible. It can be used as the quality control method of Pueraria lobata and drug.
Key words:Pueraria lobata (Willd. )Ohwi; Pueraria thomsonii; Pueraria; isoflavones; HPLC
葛根为豆科植物柴葛Pueraria lobata (Willd. )Ohwi 和甘葛藤Pueraria thomsonii Bent h. 的干燥根,前者习称柴葛,甘葛藤习称“粉葛”[1],始载于《神农本草经》,味甘、辛,性平,具有增加脑及冠状动脉血流量、降低血管阻力、收缩平滑肌、降血糖及解热等多种功效[2]。民间用于治疗伤寒、温热头痛、烦热消渴等症,也是中医常用的祛风解毒药。现代研究表明,葛根含葛根异黄酮,主要为葛根素(perarin) 、大豆苷(daidzin) 、大豆苷元(daidzein) 3种活性成分,其中葛根素是本属的特征成分,也是主要成分,为了对葛根进行有效的质量控制,本实验以葛根素为指标,以柴葛、粉葛药材为对象,建立了高效液相色谱法测定其葛根素的含量方法,并采用紫外分光光度法对其中的总黄酮进行了含量测定,为柴葛、粉葛的药材鉴定提供参考方法。
1 仪器与材料
1.1 仪器美国 Waters 公司600-2487高效液相色谱仪,Millenium数据处理系统;Waters2487紫外检测器;岛津UV-2401PC型紫外分光光度计;岛津AY120型万分之一电子分析天平;SB3200型超声清洗器。
1.2 材料葛根素对照品:中国药品生物制品检定所;甲醇为色谱纯;水为重蒸馏超纯水;其它试剂均为分析纯。柴葛产于安徽岳西,粉葛产于广西。
2 方法与结果
2.1 HPLC法测定葛根中葛根素的含量
2.1.1 色谱条件色谱柱:Zorbax XDB-C18(4. 6 mm ×250 mm , 5 μm);流动相∶甲醇-水(32∶68);流速1 ml/min;检测波长250 nm;柱温22℃;进样体积10μl。理论
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