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仙人掌总皂苷提取条件优化
仙人掌总皂苷提取条件优化
【摘要】 目的 确定仙人掌总皂苷的最佳提取条件。方法采用单因素实验设计优选仙人掌总皂苷的提取条件,仙人掌中所含有的总皂苷经5%的香草醛冰醋酸和高氯酸(1∶4)混合液处理后显色,用紫外分光光度计在波长560 nm处测定吸光值。结果与结论确定仙人掌总皂苷的最佳提取条件为以70%乙醇为提取溶剂,温度70℃,提取时间6 h,固液比1∶15。
【关键词】 仙人掌; 皂苷; 提取; 优化
AbstractObjectiveTo optimize the extraction coditions of the total saponins from Opuntia dillenii.MethodsOptimum conditions(ethanol concentration, extraction temperature, extraction time, the ration of solid to liquid of extraction system) were determined by the experiments of odd factor, after the total saponins in the Opuntia dillenii were dealt with mixed liquid of 5% vanillin-acetic acid and perchlorate(1∶4), absorption value of total saponins was determined with Ultrospec 2000 spectrophotometer at 560 nm.Results and ConclusioThe optimum condition is as follows: the solvent is 70% ethanol, the temperature is 70℃, the extracting time is 6h and Solid-liquid ration is 1∶15.
Key wordsOpuntia dillenii; Saponin; Extraction; Optimization
仙人掌是仙人掌科仙人掌(Opuntia dillenii Haw) 的根及茎。具有行气活血、清热解毒的作用。主治心胃气痛、痞块、痢疾、痔血、咳嗽、喉痛、乳痛、疔疮、烫火伤、蛇伤[1]。仙人掌属植物含有多种较为复杂的化学成分,主要含有有机酸类、甾醇类、生物碱类、黄酮类、糖类、萜类等[2]。仙人掌中的皂苷化合物是其有效成分之一[3],其三萜皂苷具有明显的镇痛作用[4]。林爱琴等[5]采用紫外分光光度法,用硫酸-乙醇显色,对仙人掌皂苷化合物进行了提取和含量测定。本文采用单因素试验研究仙人掌总皂苷的提取条件,利用紫外分光光度计测定仙人掌总皂苷的吸光值,确定最佳提取工艺,为仙人掌资源的深度开发利用打下一定的基础。
1 器材
1.1 仪器
Ultrospec 2000型紫外-可见分光光度计(Pharmacia公司);离心机(BECKMAN公司);R501型升降恒温水浴锅(上海申科机械研究所);R501型旋转蒸发器(上海申科机械研究所)。
1.2 原料及试剂
仙人掌(采自昆明水晶坡);香草醛(AR);甲醇(AR);高氯酸(AR);正丁醇 (AR);乙醇(工业酒精);冰醋酸(AR);石油醚(AR)。
1.3 试剂的配制
1.3.1 水饱和正丁醇溶液[6]
在150 ml的分液漏斗中加入21 ml水和100 ml正丁醇,振摇3 min后,静置分层,除去下层,上层则为水饱和正丁醇溶液。
1.3.2 显色剂的配置[7]
取香草醛0.1 g,加冰醋酸2 ml,再加入8 ml高氯酸,溶解摇匀,配成5%香草醛-冰醋酸和高氯酸混合溶液(1∶4)。
1.4 方法
1.4.1 样液制备
称取仙人掌粗粉5 g,置250 ml三口烧瓶中,加入一定量提取剂 ,在一定温度的水浴中回流提取一定时间,经减压抽滤后离心分离,将上层清液转入圆底烧瓶减压浓缩,转入分液漏斗中用石油醚萃取,弃去醚层,将提取液蒸发至干,用25 ml蒸馏水溶解,转入250 ml分液漏斗,用正丁醇萃取,萃取液蒸干,用甲醇溶解,转入25 ml容量瓶中定容备用。
1.4.2 单因素设计
以不同的提取剂、料液比、提取温度、提取时间为影响因素作单因子实验,确定最佳的提取条件。
1.4.3 分析方法
精确吸取0.1 ml定容后的提取液,置于10 ml具塞试管中,置水浴中挥干溶剂,立即取出,流水冷却,精密加入新配置的5%香草醛-冰醋酸和高氯酸(1∶4)混合溶
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