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泰山四叶参多糖提取及含量测定 　 作者：王德才， 李同德， 高丽君 【摘要】 目的从泰山四叶参中提取多糖并测定多糖含量。方法经脱脂、醇提后，用水提醇沉法提取多糖，用苯酚-硫酸法测定其含量。结果泰山四叶参中多糖含量为12.45%，平均回收率为99.12%，RSD=1.49%（n=4）。结论泰山四叶参多糖含量较高，具有开发利用价值。 【关键词】 四叶参； 多糖； 提取 Abstract：ObjectiveTo extract the polysaccharide and measure the content in Radix Codonopsis Lanceolatae from Mountain Taishan.MethodsThe polysaccharide was obtained with the water extraction and alcohol precipitation method, and the polysaccharide content was measured with the phenol-sulphuric acid method.ResultsThe polysaccharide content in Radix Codonopsis Lanceolatae was 12.45%, the rate of recovery was 99.12%, and RSD was 1.49%(n=4). ConclusionRadix Codonopsis Lanceolatae from Mountain Taishan contains plentiful polysaccharide, and it has much economic value. Key words：Radix Codonopsis Lanceolatae; Polysaccharide; Extracion; Content determination 四叶参Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.F.又名轮叶党参、羊乳、山胡萝卜等，系桔梗科党参属多年生草质缠绕藤本植物，在我国主要分布于东北地区，在泰山山系也有分布。四叶参为药食两用植物，在民间采其春季幼苗或根作山珍食用，美味可口。传统上其根入药，具清热解毒、止咳祛痰、补虚通乳、健身补气等功效，用于肺痈咳嗽、病后虚弱、产后缺乳等症，系泰山四大名药之一［1］。泰山四叶参的块根中含丰富的糖类化合物，但缺乏研究。本实验参考文献方法［2，3］，提取泰山四叶参多糖并测定其生药中多糖含量，以期为泰山四叶参的进一步开发利用及其多糖生物学活性研究奠定基础。 1 材料与仪器 1.1 药材四叶参采自泰山东麓，秋季挖取，洗净，切片，50℃烘干，粉碎成粗粉备用。经本院中药学教研室鉴定为四叶参的干燥根。 1.2 试剂与仪器石油醚、乙醇、丙酮、氯仿、正丁醇、浓硫酸、苯酚、葡萄糖等均为国产分析纯。中药粉碎机、RE-52A旋转蒸发仪、S-54紫外可见分光光度计、离心机、干燥箱等均为国产仪器设备。 2 方法与结果 2.1 泰山四叶参多糖的提取与精制称取泰山四叶参粗粉150 g，加4倍量石油醚回流脱脂2次，2 h/次；滤渣加4倍量80％乙醇回流提取2次，2 h/次。经脱脂、醇提后的滤渣在60℃烘干，分别加6，5，4倍量蒸馏水在95℃水浴中浸提3次，2 h/次，合并滤液，减压浓缩至200 ml左右。以每100 ml浓缩液加20 ml氯仿正丁醇（4：1）液，剧烈振荡30 min，以4 000 r·min-1离心15 min，去除下层氯仿及中层变性蛋白，取上部水层再重复去蛋白操作，至无明显中层为止。收集去蛋白后的上部水层，加无水乙醇至溶液含醇量达80％，静置过夜，以4 000 r·min-1离心15 min，收集沉淀物，再依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤各2次，得多糖粗品。再以水－乙醇重结晶纯化2次，60℃烘干，得白色粉末状精制泰山四叶参多糖8.26 g，得率5.51％。 2.2 标准曲线的制备 2.2.1 葡萄糖标准溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100 mg，加适量水溶解，转移至100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，配成1 mg·ml-1葡萄糖标准液备用。 2.2.2 5％苯酚溶液的配制取苯酚100 g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05 g，常压蒸馏，收集182℃馏分10 g，加蒸馏水200 ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。 2.2.3 标准曲线的制作分别吸取葡萄糖标准液10，20，40，60，80，100 μl置于大试管中，各补加蒸馏水至2.0 ml，葡萄糖浓度分别为5，10，20，30，40，50 μg·ml-1，