苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化及降血脂作用.doc

苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化及降血脂作用 　 作者：邴飞虹 ，但汉雄，程静，韩俊，李婧，廖一帆 【摘要】 　　目的研究苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。方法苜蓿总皂苷提取物组高、中、低剂量分别为0.7，0.35，0.18 g·kg-1，阳性组：绞股蓝总苷片56 mg·kg-1，模型组：等体积蒸馏水，灌胃同时给予高脂饲料；对已造模的大鼠，按体重1.0 ml/100g灌胃，空白组：等体积蒸馏水，灌胃同时给予普通饲料；1次/d，连续给药90 d。检查血脂相关指标、主动脉病变情况、主要脏器组织的情况。结果苜蓿总皂苷提取物使大鼠的血脂相关指标、主动脉病变情况、重要脏器组织病变情况有不同程度的改善。结论苜蓿总皂苷提取物有抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。 【关键词】 苜蓿总皂苷提取物； 大鼠； 动脉粥样硬化； 降血脂 　　苜蓿为豆科植物紫苜蓿Medicago sativa L.或南苜蓿Medicago hispida Gaertn.的全草，是多年生草本植物。苜蓿总皂苷提取物不仅对于高脂血症有治疗作用，因其毒性低微，还可作为中老年人长期使用的保健品。苜蓿提取物在防治血脂代谢紊乱和抗动脉粥样硬化方面有其独到之处。本实验主要进行苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用研究，为该新药的临床试验提供实验依据。 　　1 材料与仪器 　　1.1 受试药物苜蓿总皂苷提取物，批号：060828，061010，由广东省中山市中健药物研究所有限公司提供。用蒸馏水配制成36%，25%，14%的溶液，分别作为高、中、低剂量组，4 ℃保存备用。 　　1.2 试剂绞股蓝总苷片，由广州白云山和记黄浦中药有限公司提供，批号：E6A003，规格：每片含绞股蓝总苷20 mg，药片粉碎后加蒸馏水配成所需浓度，4℃保存备用；丙硫氧嘧啶片，由上海复星朝晖药业有限公司提供，批号：070901，规格：每片含丙硫氧嘧啶50 mg；维生素D3注射液，由上海通用药业股份有限公司提供，批号：080401，规格：7.5 mg/ml。总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)测定试剂盒，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒，批号分别为011M042、010M050，012L028，012L028，均由上海名典生物工程有限公司提供；TXB2、PG6-ket、ET放免分析药盒，批号分别为070820，070820，070820，均由北京北方生物技术研究所提供；胆固醇，由上海科瑞生物有限公司提供；戊巴比妥钠，由北京化学试剂公司提供，批号吐温80，由天津市标准科技有限公司提供，批号：070706；丙二醇，由湖北大学化工厂提供，批号：930801；蛋黄乳液，称取鲜鸡蛋黄15g加生理盐水配成75%的乳液；食用猪油，由宜昌双汇食品有限责任公司提供。 　　1.3 仪器Spctrumlab 53 power紫外分光光度计，上海棱光技术有限公司产品。TB-718E组织自动包埋机，湖北泰维医疗科技有限公司提供。TC-120S组织自动脱水机，湖北泰维医疗科技有限公司提供。RM2135石蜡切片机，德国Leica公司产品。HM525冰冻切片机，德国Microm公司产品。GC-1200放射免疫计数器，中国科学技术大学科技实业总公司中佳光电仪器分公司生产。80-2B型台式离心机，上海安亭科学仪器厂。电子精密天平，奥豪斯公司。恒温水浴锅，北京市医疗设备厂提供。WH-1微型旋涡混合仪，上海泸西分析仪器厂。 　　1.4 动物Wistar大鼠，SPF级，体质量（200±10）g，性别：雄性，由湖北省实验动物研究中心提供，许可证号：SCXK（鄂）2003-0005；动物饲料：纯系鼠料，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供；动物饲养条件：室温20～25℃，湿度40%～60%，笼具及垫料定期清洗更换。 　　2 方法 　　2.1 造模取雄性大鼠50只，每只大鼠右下肢肌肉注射维生素D3 3×105 U/kg，并给予高脂饲料（2%胆固醇，0.5%胆酸钠，3%猪油，0.2%丙基硫氧嘧啶，94.3%基础粉末饲料，维生素D3粉剂1.25×106 U/kg）。7 d后行球囊损伤手术。另取10只作为空白对照，给予普通饲料。 　　球囊损伤手术：动物用戊巴比妥钠（35 mg/kg体重）腹腔麻醉，仰卧固定，皮肤消毒，正中切开颈部皮肤，分离左侧颈总动脉，结扎远心端，插入球囊，进入约8 cm，球囊内注入0.2 ml生理盐水，向回拉动3～4 cm，放水再进入约8 cm，注水、回拉，共3次。拔出球囊，层缝合皮下组织、皮肤。消毒切口皮肤，切口处洒适量注射用青霉素粉剂。术后连续7 d给予肌肉注射青霉素，切口处用碘酒消毒。