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邻苯二甲酸二丁酯对果蝇生育力及寿命影响
邻苯二甲酸二丁酯对果蝇生育力及寿命影响
【摘要】 目的 研究邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对果蝇生育力和寿命的毒性作用。方法 将果蝇随机分为4组,分别给予含DBP为0,02%,06%和18%的培养基喂饲,雌雄配对产子,每日观察并记录子代孵化数和亲代存活数。结果 各染毒组果蝇不育的比例高于对照组,18%浓度组果蝇的平均生育数显著低于对照组(Plt;005);随着DBP浓度的增加,雌蝇平均产卵期逐渐缩短;雌雄果蝇的平均寿命也逐渐缩短。结论 DBP干扰了果蝇正常的生长发育和新陈代谢,使其生育能力降低,并加速其衰老。
【关键词】 邻苯二甲酸二丁酯
邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)作为塑料工业的主要增塑剂,广泛用于食品包装材料、容器、医疗用品及人造革等方面。随着时间的推移,DBP会逐渐从制品中释放出来,进入环境和生物体造成潜在的危害。DBP的生殖毒性和发育毒性已经引起广泛的关注。目前文献报道多为DBP对受试动物子代发育毒性的研究,大多认为DBP对亲代动物的毒性作用较轻,仅表现为高剂量组雌性动物体重下降、肝肾相对体重增加、吸收胎和死胎数增加等,雄性动物睾丸出现病理改变,表现为曲细精管萎缩、变形,精原、精母细胞减少、精子消失等〔1-5〕。近年来,有关DBP生殖发育毒性的研究大多采用啮齿类动物,而用果蝇检测环境污染物的毒效应是一项简易快速的实验技术。本实验利用果蝇观察DBP对其生育力和寿命的影响。
1 材料与方法
11 实验动物 野生型Oregon K品系黑腹果蝇,本院果蝇实验室提供。收集8h内羽化未交配果蝇,雌雄分开,用普通培养基在温度为(25±1)℃,相对湿度为50%~70%环境中培养备用。
12 主要试剂及设备 DBP(分析纯,中国医药集团上海化学试剂公司);蔗糖脂肪酸酯(乳化剂,食品级,型号S-15,金华市迪耳糖酯化工有限公司);JRJ-300-I型剪切乳化搅拌机(上海标本模型厂)。
13 培养基的制备 用12%蔗糖脂肪酸酯溶液将DBP配成不同浓度的应用液,将应用液加入普通培养基中,制成DBP终浓度分别为02%,06%,18% 3个染毒组培养基;对照组为普通培养基,对照组和染毒组培养基中乳化剂浓度均为012%。
14 方法 取5d龄未交配果蝇800只,雌雄各半,随机分为4组,每组200只,分别给予4种培养基,雌雄分开饲养。在各浓度组培养基喂饲7d后将存活的果蝇雌雄配对,每个培养基管内1对,每个浓度组40对,各组继续给予不同的培养基喂饲,并使其交配产卵。每日观察并记录亲代雌雄果蝇存活数、子代成蛹数和新羽化的果蝇数。
15 统计分析 采用SAS82统计软件进行分析,计量资料用方差分析,计数资料用χ2检验。
2 结果
21 DBP对果蝇生育量的影响(表1,2) 喂饲DBP的各染毒组亲代果蝇出现不育的比例均高于对照组,18%浓度组果蝇生育子代<40只的比例明显高于对照组,而生育子代≥40只的比例明显低于对照组(Plt;001)。18%浓度组果蝇的平均生育数为241,显著低于对照组,差异有统计学意义(Plt;005)。
表1 各组亲代果蝇生育子代多寡的分布(略)
22 DBP对果蝇生育期的影响(表3)
由表3可见,各组亲代已育果蝇的产卵期分布构成比差异有统计学意义(P<001)。对照组和02%浓度组中超过50%果蝇的产卵期≥20d,06%浓度组果蝇的产卵期主要集中在10~19d,而18%浓度组中有515%果蝇的产卵期<10d。即随着DBP浓度的增加,果蝇产卵期变短的比例在增大,平均产卵期逐渐缩短,18%浓度组与对照组比较平均产卵期减少53d,差异有统计学意义(Plt;005)。
表2 各组亲代果蝇的平均生育数(略)
注:与对照组比较,*Plt;005
表3 各组已育果蝇的产卵期分布和平均产卵期(略)
注:与对照组比较,*Plt;005
23 DBP对亲代果蝇寿命的影响(表4) 随着DBP浓度的增加亲代染毒果蝇的平均寿命呈现逐渐缩短的趋势,18%浓度组雌蝇的平均寿命比对照组缩短131d,经统计学检验差异有统计学意义(Plt;001);06%和18%浓度组雄果蝇的平均寿命分别比对照组缩短56和144d,差异有统计学意义(Plt;005和Plt;001)。
表4 DBP对亲代染毒果蝇平均寿命的影响(略)
注:与同性别对照组比较,*Plt;005;**Plt;001
3 讨论
目前普遍认为,DBP是环境内分泌干扰物(EEDs)的一种。结果发现,DBP可明显降低染毒果蝇的生育能力,导致不育率升高和子代数目的减少,此结果与啮齿类动物
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