丝氨酸-苏氨酸激酶15蛋白在结肠癌表达.docVIP

丝氨酸/苏氨酸激酶15蛋白在结肠癌表达 　【关键词】 结肠肿瘤；,蛋白质,丝氨酸；,苏氨酸激酶；,免疫组织化学；,基因表达 　　摘要: 目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15（STK15）蛋白在结肠癌组织中的表达，以及与临床病理指标的关系。 方法 采用免疫组织化学检测STK15在102例手术切除结肠癌的肿瘤组织及癌旁组织中的表达，并分析肿瘤组织中STK15表达与肿瘤临床病理特征之间的关系。 结果 STK15在结肠癌组织中的阳性率为44.12%(45/102)，明显高于癌旁组织2.94%(3/102，Plt;0.01)；STK15蛋白过表达与结肠癌分化密切相关(Plt;0.05)，与其他临床病理指标无关。 结论 STK15蛋白过表达程度可望作为判定结肠癌分化程度的新指标。 　　关键词: 结肠肿瘤； 蛋白质，丝氨酸； 苏氨酸激酶； 免疫组织化学； 基因表达 　　A:正常肠黏膜细胞质内未见棕黄色染色; B:低分化结肠癌细胞质内未见棕黄色染色; C:高分化结肠癌细胞质内见棕黄色染色. 　　图1 丝氨酸/苏氨酸激酶15蛋白在结肠黏膜上皮细胞的表达(DAB染色,苏木精衬染 ×200)（略） 　　Fig 1 The expression of STK15 in colorectal mucosa epithelium 　　研究表明，丝氨酸/苏氨酸激酶15(STK15)在肿瘤中的过表达与细胞中心体的异常扩增及恶性转化密切相关，且过表达与肿瘤的某些生物学行为相关联[12]。笔者用免疫组织化学技术检测102例结肠癌组织中STK15蛋白的表达，分析其与结肠癌临床病理学指标间关系，试图阐明STK15蛋白在结肠癌发生发展中的作用。 　　1 对象与方法 　　1.1 对象 选择2004年4月～2005年12月结肠癌患者的手术切除存档蜡块标本,每例均有癌旁组织作为对照，所有患者术前未作放疗或化疗。所有标本为４%甲醛固定,常规石蜡包埋。102例中,男性58例，女性44例，年龄（59.5±4.1）岁（27～78岁）。所有病例临床及病理资料完整，包括结肠癌70例，直肠癌32例；病理学分级67例高/中分化，35例低分化（黏液癌11例，印戒细胞癌8例）；淋巴结转移阴性68例，阳性34例；Dukes分期：A期24例，B期33例，C期24例，D期21例。 　　1.2 方法 标本作3～5 μm 连续切片，进行免疫组织化学(SP法)测定。兔抗人STK15多克隆抗体购自美国Santa Cruze公司，免疫组织化学SP试剂盒和DAB显色试剂购自福州迈新生物技术开发有限公司。依常规免疫组织化学方法,按试剂盒说明书操作,取所售阳性对照片同步操作作阳性对照；用PBS 代替一抗作阴性对照。DAB显色STK15的表达强度分为：（）3分，（+）2分，（±）1分，（-）0分。STK15按表达阳性细胞百分率分为4组：lt;25%细胞阳性（1分），25%～49%细胞阳性（2分），50%～75%细胞阳性（3分），gt;75%细胞阳性（4分）。最终分数按以上表达强度及阳性率两个参数的乘积计算，将所有病例分为STK15阴性（最终分数0～6分）及阳性（最终分数7～12分）。切片苏木精对比染色。封片后由两位资深病理科医师在双盲情况下评价随机选择的10个高倍镜视野。 　　1.3 统计学处理 应用SPSS 11.0软件包进行统计，采用卡方检验，Plt;0.05为差别有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 免疫组织化学检测 STK15表达主要位于结肠癌细胞，癌旁组织上皮及间质细胞不表达或弱表达，STK15在结肠癌组织中的阳性率为44.12%(45/102)，明显高于癌旁组织2.94%(3/102)(Plt;0.01)，阳性表达位于肿瘤细胞质中（图1）。 　　　2.2 STK15与102例结肠癌的临床病理指标的关系 STK15在结肠癌高/中分化组表达程度明显高于低分化（包括低分化腺癌、印戒细胞癌和黏液细胞癌）组(Plt;0.05)；在低分化腺癌组织中的阳性率为25.00%(4/16)，在印戒细胞癌组织中为25.00%(2/8)，在黏液细胞癌中为27.27%(3/11)。STK15表达程度与患者年龄、性别、临床分期无关（P＞0.05，表1）。 　　表1 STK15表达与结肠癌临床病理特征的关系（略） 　　Tab 1 Relationship between STK15 expression and clinicopathological parameters in colorectal carcinomas 　　STK15：丝氨酸/苏氨酸激酶15蛋白. 组间比较，☆：Plt;0.05. 　　3 讨论 　　人类STK15基因，又称AuroraA、BTAK、STK6，定位于20号染色体，cDNA长约1.8 k