整合素α-%2cV-β-%2c6-和TSP-1对移植肾慢性纤维化分子通路的影响及机制初步探讨.pdfVIP

Trevillian等人首次报道了在多种原发肾脏疾病和肾移植后发生慢性移植物肾病患 者中均有整合素a，B 6表达的明显上调”。；但此项研究并没有对于整合素d，B6是 否通过活化TGF-BI来引起移植物肾病的慢性纤维化病理改变的问题进行探讨。陆 ● 续关于整合素d，B 6的研究中很少有肾移植方面的报道。所以，目前这一过程相关 分子机制至今仍不清楚。 那么，在移植后的肾脏的缓慢进展性纤维化的过程中，其主要的介导分子TGF- pl的体内活化通路由整合素q，B6和TSP-1中哪一类分子参与，究竟以上述哪类 活化剂为主，是一个值得探索的问题。 有鉴于此，本课题进行了整合素Q，p6和TSP-1对移植肾慢性纤维化的分子通 路的影响及相关机制的初步探讨，试图进一步阐明整合素a，B6和TSP-I通过活 化TGF-B1，引起TGF-B 1表达的上调，从而介导移植肾纤维化的轴向关系。此外， 还对TGF-B l自身的表达和其磷酸化的一个主要下游途径即Smad2信号通路的情况 进行了研究。 本课题选取了慢性移植物肾病、环孢中毒和急性排异这三组病例进行研究和比 较。一方面是因为它们代表了移植手术后患者临床上出现肾功能恶化的主要的常见 病种；另一方面，TGF-B I在这三种不同病变进展过程中所发挥的作用有异，并且 发病机制中引起TGF．BI表达上调的原因也有所区别：首先，在慢性移植物肾病的 发展中，由于肾移植后各种免疫和非免疫性致病因素导致的肾小管损伤和慢性血管 病变加重了供血的不足，促使局部细胞因子分泌增加，引起包括TGF-B l在内的表 达上调，而TGF-B ● l则通过促基质分子合成，抑制基质降解等来促进慢性纤维化过 程，而这正是慢性移植物肾病的主要病理改变，所以TGF-Bl是比较公认的慢性移 植物肾病中的关键性介导因子。其次，越来越多的有关环孢中毒的报道中提出了 TGF．B I这一细胞因子和环孢中毒患者肾脏的间质纤维化存在一定的关系，并且认 为在这类疾病中可能是通过血管紧张素Ⅱ系统的激活来上调TGF-B1蛋白的表达 的，但目前相关的研究还在深入。再次，TGF-9l作为主要在慢性纤维化中起作用 的分子，和急性排异这样的急性病变的相关性较小。所以，我们通过测定上述分子 在这三类不同病变中的表达情况，研究TGF．Bl通路的不同作用。同时我们通过研 究TSP-1和整合素d，B6，为进一步明确移植肾慢性纤维化的分子机制及今后寻找 更有效的干预靶点提供理论依据。 ● 材料与方法 一．试剂与仪器 1． 小鼠抗人IntegrinⅡ，B 6单克隆抗体 Chemicon公司 2． Santa 山羊抗人TSP一1多克隆抗体 Cruz公司 3．兔抗大鼠TGF—B1多克隆抗体 SantaCruz公司