心肌炎患儿TNFα IL-6及心肌酶相关性分析.docVIP

心肌炎患儿TNFα IL-6及心肌酶相关性分析 　;作者：苗晓华 李锦娟 【摘要】; 　　目的：探讨肿瘤坏死因子（TNFalpha;）、白细胞介素6（IL-6）在病毒性心肌炎（VM）患儿发病中的作用。方法：采用酶联免疫吸附（ELISA）方法，对30例VM患儿在急性期和恢复期（28例）以及20例正常儿童血清和外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液诱生TNFalpha;、IL-6进行检测。结果：VM急性期血清和PBMC上清液TNFalpha;、IL-6水平明显高于恢复期和正常对照，恢复期仍高于对照组。急性期血清肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）增高28例，乳酸脱氢酶同工酶（LDH1）增高26例。相关分析提示：VM急性期TNFalpha;、IL-6与CK-MB和LDH1呈正相关。结论：TNFalpha;、IL-6在心肌炎的致病中起一定作用，其相关指标呈动态变化，可作为病情变化及预后的一个观察指标及依据。 【关键词】; 心肌炎　肿瘤坏死因子　白细胞介素6 　　病毒性心肌炎是小儿常见的心血管疾病之一，近年来发病有增加的趋势，对于其发病机制国内外研究多年，免疫机制所起的作用日益受到重视。TNFalpha;、IL-6被称为炎症细胞因子，参与了许多炎症性疾病的发生和发展。本研究对小儿VM不同时期的血清和PBMC诱生的TNFalpha;、IL-6的动态变化进行检测，旨在从临床方面进一步探讨VM发病的免疫机制，为估计病情和预后提供客观依据。 ; 1; 临床资料 ; 1.1; 病例选择 ; 受检对象系我院2003年2月～2006年2月住院VM患儿，其中男17例，女13例，年龄3岁～14岁。在病情的急性期（入院后24 h内）和恢复期（发病后1月～2月）进行各项指标检测，所有病例均无用激素史，同期同年龄组健康儿童20例，作为对照组（2 W前，无上呼吸道感染）。 ; 1.2; 诊断标准 ; 诊断标准及临床分期根据第六届小儿心血管专业学术会议修订的VM诊断标准［１］，并除外其它疾病；病原学诊断依据是心肌炎发病前1 W～2 W有病毒感染史，发病早期外周血中柯萨基病毒特异性抗体IgM阳性。 ; 1.3; 方法 ; 1.3.1; 标本收集：急性期患儿于入院次日收集清晨空腹静脉血6　mL,用乙二胺四乙酸二肝抗凝；恢复期患儿在发病后1月～2月间采血。 ; 1.3.2; 心肌酶谱检测由我院检验科完成。 ; 1.3.3; PBMC诱生TNFalpha;、IL-6无菌条件下用淋巴细胞分离液（上海试剂二厂）分离PBMC，用RPMI 1640将PBMC调成１times;106/mL，培养液中加脂多糖（LPS，10 mu;g/mL），置37 ℃，5% CO2培养箱培养72 h，离心收集上清液后，-30 ℃以下储存待测。 ; 1.3.4; 血清和PBMC上清TNFalpha;、IL-6水平的检测血清和PBMC上清液中TNFalpha;、IL-6的检测均采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）。用450 nm酶标仪测OD值，通过绘制标准曲线，计算样品中TNFalpha;、IL-6的含量。试剂盒由北京晶美生物工程有限公司提供（进口分装）。 ; 1.3.5; 统计学处理，各期间采用方差分析和两两比较q检验或成对t检验。急性期TNFalpha;、IL-6和CK-MB、LDH1的相关关系采用直线相关分析。 ; 2; 结果 ; 2.1; 病毒性心肌炎各期心肌酶谱的变化 ; VM急性期血清CK-MB、LDH1均高于恢复期和正常对照，LDH2则低于恢复期和正常对照。LDH3与恢复期和正常对照无显著意义（见表1）。表1; VM各期血清CK?MB、LDH测定结果及比数Plt;0.01 2.2.; 各组血清TNFalpha;、IL-6水平 ; VM患儿血清TNFalpha;、IL-6水平呈动态变化，急性期血清 TNFalpha;、IL-6水平明显高于恢复期和对照组。恢复期血清水平明显降低但仍高于正常对照组(见表2）。 表2; VM患儿与对照组血清TNFalpha;、IL-6检测结果 ; 2.3.; PBMC诱生TNFalpha;、IL-6的水平 ; VM急性期PBMC经LPS刺激后产生TNFalpha;、IL-6的水平明显高于恢复期和正常对照，恢复期TNFalpha;、IL-6有高于正常对照组（见表3）。表3; VM患儿各期对照组PBMC上清液TNFalpha;、IL-6检测结果; ; 2.4; 急性期血清TNFalpha;、IL-6水平与CK-MB和LDH1的相关性急性期血清TNFalpha;、IL-6与CK-MB、LDH1呈正相关（见表4）。表4; 患儿急性期血清TNFalpha;和IL-6与CK-MB和LDH1的相关性; ; 3; 讨论 ; 小儿VM的