热休克蛋白gp96在喉癌中表达及临床意义.docVIP

热休克蛋白gp96在喉癌中表达及临床意义 　【摘要】 目的 检测热休克蛋白gp96在喉癌中的表达，并探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组织化学方法检测46例喉癌组织热休克蛋白gp96的表达。结果 T1～2期喉癌患者癌组织与T3～4期患者比较，T1～2gp96表达的阳性百分率较高，其差异有显著性意义（ P＜0.05）。病理学Ⅰ级患者与病理学Ⅱ～Ⅲ级患者比较，Ⅰ级患者癌组织gp96表达的阳性百分率较高，其差异有显著性意义（ P＜0.05）。有颈淋巴结转移的患者gp96表达的阳性百分率明显低于无颈淋巴结病理转移的患者(P＜0.01)。热休克蛋白gp96阳性表达与患者年龄（P＝0.680）、性别（P＝0.888）、吸烟史（P＝0.819）、肿瘤生长部位（P＝0.580）无相关性。结论 热休克gp96的表达与喉癌的发生发展密切相关，其表达可以作为判断预后的参考指标之一。 【关键词】 热休克蛋白 gp96 喉癌 　　0 引言 　　热休克蛋白（Heat shock protein,HSP）又称应激蛋白，是生物细胞在受热或其他理化因素（如低氧、病毒感染、紫外线照射等）作用下产生的一组高度保守的蛋白质。根据分子量的不同可以分为HSP100、HSP90、HSP70、HSP60、小分子HSP（2223KD）及泛素（78KD）等几个家族。热休克蛋白作为分子伴侣，参与其他蛋白质的折叠、运转、合成等过程。国内外研究发现许多肿瘤细胞表面可以高度表达或特异表达不同亚族HSPs，在机体发挥抗肿瘤的特异性细胞毒免疫应答中有重要作用。gp96是HSP90家族的成员之一，因分子量为96KD而得名。本文将探讨热休克蛋白gp96在喉癌中的表达及其与喉癌发生发展及预后的关系。 　　1 资料与方法 　　1.1 标本来源 　　收集1999年12月～2004年12月在白求恩国际和平医院耳鼻咽喉－头颈外科接受手术的46例喉鳞状细胞癌患者，术前均未进行化疗和放疗。所有病例临床资料完整，其中男42例，女4例，年龄36～80岁，平均57.8岁。根据国际抗癌协会（UICC）标准（1997）确定TNM分期。喉癌分型：声门上型14例，声门型32例；临床T分期：Ⅰ期8例、Ⅱ期9例、Ⅲ期14例、Ⅳ期15例；病理学分级：鳞癌Ⅰ级15例，鳞癌Ⅱ级20例、鳞癌Ⅲ级11例；病理证实颈部淋巴结转移组12例，无转移组34例。所有标本均离体后2h内放入10%中性福尔马林中固定24h，石蜡包埋，常规病理HE染色，并确定病理性质和病理学分级。 　　1.2 gp96蛋白的免疫组织化学检测 　　常规石蜡切片，每张切片厚5μm。采用免疫组织化学SABC法检测gp96蛋白表达，SABC试剂盒购自博士德公司，按试剂盒操作说明书操作。gp96抗体购自Santa公司，为多克隆抗体，工作浓度为1∶100。每次染色均设用PBS代替一抗的阴性对照。 　　1.3 结果判定标准 　　gp96蛋白阳性以在组织切片中显示细胞浆为淡黄色至深黄棕色者为阳性细胞标志，凡细胞浆显色强度与背景无明显差别者为阴性细胞。细胞浆显示为淡黄色为+，细胞浆显示为黄棕色者为++，细胞浆显示为深黄棕色者为+++。 　　1.4 统计学处理 　　所有数据经Excel软件整理，应用美国SPSS11.0统计软件进行分析。资料用单因素χ2检验进行统计分析。以双侧P≤0.05为差异有显著性意义，Ｐ≤0.01为差异有非常显著性意义。 　　2 结果 　　 　　2.1 gp96蛋白在喉鳞状细胞癌的表达 　　在喉鳞状细胞癌中gp96蛋白阳性染色定位于肿瘤细胞胞浆，为粗细不一的棕黄至棕褐色颗粒。在46例喉鳞状细胞癌中阳性表达率为100%。其中24例蛋白呈阳性+，阳性表达率为52.2%（24/46）;20例蛋白呈阳性++，阳性表达率为43.4%(20/46)，2例蛋白呈阳性+++，阳性表达率为4.4%(2/46)。 　　　2.2 gp96蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达与临床因素之间的关系 　　用单因素χ2检验分析46例喉鳞状细胞癌患者的临床因素与gp96蛋白表达之间的关系。结果显示，gp96蛋白阳性表达与患者年龄（P＝0.680）、性别（Ｐ＝0.888）、吸烟史（Ｐ＝0.819）、肿瘤生长部位（Ｐ＝0.580）无相关性，见表1。 　　临床T1～2期的喉鳞状细胞癌患者共17例，其中gp96表达+为5例，占29.4%（5/17），++为10例，占58.8%(10/17)，+++为2例，占11.7%(2/17); 而T3～4期患者29例中，gp96表达+为19例,占65.5(19/29)，++为10例，占34.5%(10/29)，+++为0例。与T1～2期患者表达的gp96阳性百分率与T3～4期患者比较其差异在统计学上有显著性意义（P＜0.05），这