人IL-29的定点突变及抗肿瘤活性初步分析.PDF

702 生 物 工 程 学 报 陈伟 等/人IL-29 的定点突变及抗肿瘤活性初步分析 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn May 25, 2015, 31(5): 702−710 DOI: 10.13345/j.cjb.140429 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 医学与免疫生物技术 IL-29 1 2 2 3 2 1 1 陈伟 ，朱荣 ，葛春蕾 ，陆源 ，李利云 ，李菲 ，邬敏辰 1 214122 2 214122 3 214122 , , , . IL-29 . , 2015, 31(5): 702–710. Chen W, Zhu R, Ge CL, et al. Site-directed mutagenesis of human IL-29 and antineoplastic activity of the recombinant human IL-29 variant. Chin J Biotech, 2015, 31(5): 702–710. 摘 要: 为探讨人白细胞介素-29 (hIL-29) 变异体的抗肿瘤活性，根据hIL-29 成熟肽的生物信息学分析数据， 采用大引物PCR 方法对其肽链第33 位赖氨酸、35 位精氨酸的编码基因进行定点突变，获得的hIL-29 变异体 基因构建重组真核表达质粒转化毕赤酵母 (Pichia pastoris) GS115 进行发酵表达，经纯化得到重组人白细胞介 素-29 变异体蛋白 (rhIL-29mut33,35) 。经 CCK-8 法检测抗肿瘤细胞增殖的数据显示，rhIL-29mut33,35 对肝癌细胞 BEL7402 、结肠癌细胞HCT8 和胃癌细胞 SGC7901 的增殖均具有抑制作用，高剂量组对这3 种肿瘤细胞的增 殖抑制率分别为 (30.99 ± 1.58)% 、(22.47 ± 1.37)% 和 (32.05 ± 2.02)% ，而且抗增殖作用比野生型rhIL-29 的更 强 (P 0.01) ，表明变异体rhIL-29mut33,35 具有潜在的医药开发价值。 : 白细胞介素-29 ，定点突变，变异体，抗肿瘤活性 Received: August 29, 2014; Accepted: November 15, 2014 Supported by: National Undergraduate Innovative Training Programs (No. 201210295024). Corresponding author: Wei Chen. Tel: +86-510 E-mail: chenwei@ (No. 201210295024 ) 2015-02-03 /kcms/doi/10.13345/j.cjb.140429.html 陈伟 等/人IL-29 的定点突变及抗肿瘤活性初步分析 703 Site-directed mutagenesis of human IL-29 and antineoplastic activity of the recombinant human IL-29 variant 1