Interlab G26碱性血红蛋白电泳.pdf

Microgel 与 Interlab G26 碱性血红蛋白电泳程序 （试剂盒：SRE604K） █ 用途 Microgel/Interlab G26碱性血红蛋白电泳试验试剂盒用于采用琼脂糖凝胶 (agarose gel)分离正常血红蛋白(A、A 及F）与某些异常或变异血红蛋白(S或D 1 2 和C或E)的体外诊断。为了区分血红蛋白S与D或C与E，必需一种相互确证试验， 如酸性血红蛋白电泳。 本电泳试验在碱性pH条件下进行，并提供有价值的血红蛋白电泳图扫描方 法。电泳图的光密度测量可对血红蛋白条带的相对定量。 试剂盒SRE604K设计用于全自动仪器Microgel/Interlab G26。 █ 概述 血红蛋白(Hb)是在红细胞中发现的一种蛋白质，其作为氧气（O ）载体而扮 2 演重要角色，氧气在肺部与血红蛋白结合，并释放到组织和器官中以维持细胞的 生命力。 血红蛋白分子是一种含有 2 种不同类型蛋白质（称为珠蛋白）成对组配而成 的四聚体。α型珠蛋白总是存在于各种正常血红蛋白中，其他类型的珠蛋白(称 为β、δ、γ等）决定不同的血红蛋白分子，并决定其生物学功能。每条珠蛋白 链中含有一个亚铁血红素(其中有1个铁原子）。 正常成人红细胞中存在 3 种不同类型的血红蛋白，HbA 是主要类型，同时 还在少量的 HbA2 及 HbF 。这些血红蛋白是由以下珠蛋白链组合成分的 1、2 ： • 血红蛋白A（HbA）：α2β2 • 血红蛋白A （HbA）：α2δ2 2 2 • 血红蛋白F（HbF）：α2γ2 血红蛋白的合成受基因控制。α珠蛋白链有 4 个编码基因，而β珠蛋白链只 有2个编码基因。在胎儿期，有2个附加基因负责γ链的合成。 尽管基因数不同，但α和β链的蛋白质合成产生等数量的多肽链，这些肽链 在成熟中的红细胞中装配成血红蛋白。 这些基因的核苷酸顺序可能由于经历一个称为突变的过程而发生偶然性改 变，突变最终导致多肽链上的氨基酸替代，产生一种修改的血红蛋白分子。 这些突变血红蛋白 (mutant hemoglobin) 也称为变异血红蛋白 (variant hemoglobin ），其分子结构可能显示最终引起病理状况的质变，这些病理状况称 、 、 为血红蛋白病 1 2 5 。 2 种最常见的突变血红蛋白是 HbS 和 HbC6 ，其他变异血红蛋白，如 Hb Lepore 、HbE 、HbG-Philadelphia 、HbE-Los Angeles 及 HbO-Arab 也可检出 4 。 某种血红蛋白肽链合成比率的降低或改变，导致血液血红蛋白浓度的量变， 5 所引发的疾病称为“地中海贫血” 。 目前已鉴定600 种人类血红蛋白变异体，其中大约 1/4 具有足够改变的净蛋 白质电荷，使其在碱性pH 条件下的凝胶电泳能够检出 6 ；其他类型血红蛋白的 1 2013-02-19 译 研究通常需要不同的或高度精细的实验室技术。 在碱性 pH 条件下，一些变异血红蛋白显示相同或相似的电泳迁移率，在电 泳图上表现为相同位置上的条带叠加。一起迁移血红蛋白的典型例子包括 HbC 与 HbE （它们迁移到与HbA2 相同的位置），HbG 与 HbS 位置叠加。确证试验通 过酸性 pH 条件下的电泳来进行，因为在此不同的化学环境中，这些变异血红蛋 白在电泳图上占据不同的位置3、4 。 █ 原理 正常血红蛋白和多数变异血红蛋白有不同的电泳迁移率，可以通过琼脂糖凝 胶在碱性缓冲液电泳，根据其净电荷来加以分开。条带电泳分离完