农杆菌介导的BcWRKY2基因原位转化玉米茎尖的初步研究.PDFVIP

作物杂志 Crops 20 13. 4 农杆菌介导的BcWRKY2 基因原位转化 玉米茎尖的初步研究 曹士亮1 ，2 李文滨1 王 石1 林忠平3 卢翠华1 1 2 ( ，150030 ， ; ，150086 ， ; 东北农业大学农学院 黑龙江哈尔滨 黑龙江省农业科学院玉米研究所 黑龙江哈尔滨 3 ，10087 1， ) 北京大学生命科学学院 北京 ， 。 摘 要 利用农杆菌介导的原位转化方法将植 米基 因组中 并且得到表达 物抗旱相关转 录 因子BcWRKY2 基 因导入优 良玉米 关键词 玉米; 农 杆 菌介 导; 原 位 转化; Bc- 58 、K10 、 Mo17 。 自交 系郑 黄早 四和 采 用正交设 计 WRKY2 基 因 、 、 ( AS) 、 对玉米品种 菌液浓度 乙酰丁香酮浓度 真空 处理 时间和表 面活性剂 Silwet-77 浓度进行 了优化 。 、 干旱 盐碱和低温等逆境环境胁迫因子严重制 ， 研究结果表 明 各 因素对转化 率影响顺序依 次是菌 约玉米生产的发展。应用基因工程技术将外源抗逆 液浓度 ＞ 品种 ＞ AS 浓度 ＞ 真空处理 时间 ＞ Silwet- 基因导入玉米， 进而选育出玉米抗逆品种已经成为 77 。 58 、 ［1 － 2］ 浓度 确定 了最优转化条件为品种郑 真空处 有效解决这一问题的重要途径 。建立良好的受 20min 、 OD = 0. 9 、AS 浓 度 理时 间 菌 液 浓 度 为 600 ， 体系统是玉米转基因技术的一个重要环节 有研究 100 μmol / L 、Silwet-77 浓度 0. 05% 。PCR 及 RT-PCR 表明， 、 、 、 、 玉米幼胚 幼穗 成熟胚 花药 茎尖等都能诱