农杆菌介导的sbe2a基因RNAi载体对玉米遗传转化的研究.PDFVIP

20 11. 2 作物杂志 Crops 农杆菌介导的sbe2a 基因 RNAi 载体对玉米遗传转化的研究 关淑艳 赵丽娜 刘慧婧 刘广娜 王丕武 ( ，130 118 ， ) 吉林农业大学生物技术中心 吉林长春 摘 要 将淀粉分支酶基因sbe2a 的RNAi 表 米的SBE Ⅱa 还可直接参与支链淀粉中短链的合 达载体转入玉米自交系H99 和丹598 胚性愈伤组 ［13 － 16］。 ， 成 因此 调解淀粉分支酶基因的表达可以影 。 、 织 探讨了不同菌浓度 不同侵染时间和不同的共 ， 响细胞内酶的含量或活性 从而控制淀粉的结构和 培养时间对玉米转化率的影响， 确定了最佳转化条 含量， 。 影响作物的品质 : OD 0. 5 ～ 0. 7 ， 件 菌液浓度 600 值为 侵染时间为 本研究以玉米自交系 H99 和丹598 的胚性愈 25min ， 3d 。 共体培养时间为 对转化的愈伤组织分 ， sbe2a RNAi 伤组织为材料 将 基因 植物表达载体导 PCR ， 2 化诱导出苗后进行 检测 获得了 株阳性植 ， 入玉米中 探讨了影响农杆菌介导的玉米遗传转化 ， 。 株 初步证明外源基因已经整合到玉米的基因组中 的部分因素。旨在通过基因工程技术实现操纵分支 ; sbe2a ; 关键词 农杆菌介导法 淀粉分支酶基因 ， 酶基因的表达及控制淀粉的合成途径 以期获得高 RNAi ; 表达载体 玉米 直链玉米淀粉新品种。 1 材料与方法 。 玉米是重要的粮食作物和工业原料 玉米淀粉 、 、 、 、 、 、 广泛应用于食品 医药 造纸 化学 纺织 建筑 石油 1. 1 试验材料 、 ， 化工 燃料和塑料业等工业领域 特别是直链淀粉的 1. 1. 1 植物材料 玉米(Zea mays L. )受体自交系 ， 30 ， 、 、 用途极为广泛 涉及 多个领域 如食品 医疗 纺 为H99 和