杉木遗传转化受体系统的建立.PDFVIP

维普资讯 第 3O卷第 6期 南 京 林 业 大 学 学 报 (自然 科 学 版) V01．3O，NO．6 2006年 11月 JournalofNanjingForestryUniversity(NaturalSciencesEdition) Nov．，2006 杉木遗传转化受体系统的建立 席梦利，施季森 ● ● (国家林业局、江苏省林木遗传和基 因工程重点实验室(南京林业大学)，江苏 南京 210037) 摘 要 ：以杉木试管苗靠近茎尖 的茎段为外植体 ，通过不同预培养时间及不 同浓度6一BA、TDZ、头孢霉素、卡 那霉素等处理，分析诸 因素对茎段再生芽的影响，建立 了以杉木茎段为外植体 的高频再生系统。结果表 明： DCR+6一BA(1．0mg／L)+TDZ(O．001mg／L)+NAA(0．1mg／L)最适干杉木茎段诱导芽发生 ，预培养时间 为 2d时，芽诱导频率、平均芽数和芽形成能力最高。切片观察发现，茎段发生的芽多起源干茎段表面，是农杆 菌容易抵达 的位置 ，说 明茎段附着农杆菌的细胞与再生芽的部位相一致。 关键词 ：杉木 ；器官发生；受体系统 中图分类号 ：$722．3 7 文献标识码 ：A 文章编号：lOOO一2006(2006)06—0007—05 EstablishmentofReceptorSystem forGeneticTransformation ofCunninghamialanceolata Hook． XIMeng-li，SHIJisen (TheKeyLaboratoryofForestGeneticsandGeneEngineeringoftheStateForestryAdministration andJiangsuProvince(NanjingForestryUniversity)，Nanjing210037，China) Abstract：Usingplantletshootsectionsneartheshoottipasinitialexplants，weobservedthe effectsofseveralfactorson inductionbuds，suchaspre-culturetime，6一BA，TDZ，Cef， Km．From shootsectionsweestablishedareceptorsystem forgenetictransformation．The resultsindicated thatforshootsectionsinduction budstheoptimalmedium wasDCR+ 6一BA(1．0mg／L)+TDZ(0．001mg／L)+NAA(0．1mg／L)．Pre-culturedfortWOdays，the budinductionfrequency，averagenumberofbudandbudforming capacityallreachedthe maximum，whichwaslOO ，6．35and6．35，respectively．Histologicalobservationsindica— tedthatbudsoriginatefrom thesurfaceoftheshootsections，whereAgrobateriumtumefa— cienscanreach．ItwasshownthatstickingA．tumefacie