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- 2017-10-07 发布于湖北
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第三章 生物信息的传递(上) 王印 DNA是遗传信息的贮存者,蕴藏于DNA的遗传信息传递到RNA分子,然后再传给蛋白质,蛋白质是遗传信息的体现者,这就是遗传信息流向的中心法则,也是基因表达的基本步骤。 主要内容 一、RNA的转录 二、启动子与转录启始 三、原核生物和真核生物mRNA的特征比较 四、终止与抗终止 五、内含子的剪接、编辑及化学修饰 一、RNA的转录 一、RNA的转录 基因转录是基因表达的第一步,也是最关键的步骤。 一个基因能否表达的关键往往是在转录阶段。 所以阐明转录的分子机制是了解基因表达极为重要的内容。 一、RNA的转录 基因表达的完成必须通过遗传信息从DNA到RNA然后从RNA到蛋白质。 RNA分子以DNA分子的一条链为模板在依赖于DNA的RNA聚合酶催化下合成。 依赖于DNA的RNA聚合酶也简称为RNA聚合酶。 RNA分子的合成被起始、被延长、被终止的过程叫转录。 一、RNA的转录 转录是由RNA聚合酶催化、通过互补碱基配对来合成RNA的反应。 基因的DNA总是以mRNA相一致(除了T和u之间的差别外) 的非模板链序列来表示。非模板链称为有意义链,又称为编码链。合成RNA的转录模板DNA称为反义链或模板链。 一、RNA的转录 1、基本过程 一、RNA的转录1、基本过程 1、基本过程 (1)模板识别:RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。 原核基因中进行起始反应所必要的全部序列称为 “启动子”。 一、RNA的转录1、基本过程 (2)转录启始:起始是RNA聚合酶结合到基因的双链DNA上,局部解链,使底物dNTP与模板链的碱基进行配对。随着第一个核苷酸的参入,起始阶段结束。 第一个核苷酸参入的部位称为起始位点。 一、RNA的转录1、基本过程 (3)延伸:是底物核苷酸共价加入到生长的多核苷酸链的3‘端,在解螺旋区域形成暂时的 RNA—DNA杂合分子。聚合酶沿着DNA移动,一段短的双螺旋解开,使模板链不断暴露出新的单链部分。 随着聚合酶向前移动,合成的RNA从模板DNA脱开,模板DNA又与有意义链配对成为双链。 一、RNA的转录1、基本过程 (4)终止:包括识别某一个终止位点,碱基不再加到链上,磷酸二酯键的形成停止,转录复合物的移动终止,酶和RNA脱离模板,DNA重新形成双螺旋。 一、RNA的转录1、基本过程 一、RNA的转录1、基本过程 一、RNA的转录 2、转录机器的主要成分 一、RNA的转录2、转录机器的主要成分 2、转录机器的主要成分 (1)RNA聚合酶 (2)转录复合物 一、RNA的转录2、转录机器的主要成分 (1)RNA聚合酶: RNA聚合酶最基本活性是在RNA合成中指导底物同模板DNA碱基配对以及催化磷酸二酯键的形成。目前研究得最透彻的是大肠杆菌聚合酶。 一、RNA的转录2、转录机器的主要成分 一、RNA的转录2、转录机器的主要成分 一、RNA的转录2、转录机器的主要成分 一、RNA的转录 3、RNA合成的基本特性 一、RNA的转录3、RNA合成的基本特性 3、RNA合成的基本特性 (1)底物前体:RNA合成的前体是4种5’—核糖核苷三磷酸(5’—ATP、GTP、CTP和UTP)。 在聚合反应中,一个 NTP的3‘OH基因与第二个NTP的5’P发生聚合,形成磷酸二脂键,释放出焦磷酸和自由能,从而推动反应向聚合方向进行。 这与DNA合成中发生的反应基本相同。 一、RNA的转录3、RNA合成的基本特性 (2)模板:被转录的DNA区域总呈双链形式,但在任何特定区域中只有模板链(反义链)作为RNA合成的模板。 按碱基配对的原则,依靠NTP与DNA上碱基配对的亲和性被选择。所以在转录区域内DNA双链必须部分解链,形成模板链DNA与转录产物RNA的部分双链,随着转录向前推进,释放出RNA,又恢复成双链DNA。 一、RNA的转录3、RNA合成的基本特性 (3)RNA合成的方向: 新合成的RNA链总是按5‘-3’方向进行延伸。 底物5‘-NTP总是加到新生链的3’-OH末端,与DNA聚合反应的链延伸方向相同。 RNA链的5’-3’合成方向与模板DNA的方向总是反向平行的。 二、启动子与转录启始 二、启动子与转录启始 1、启动子 二、启动子与转录启始 1、启动子: 启动子是一段特定的直接与RNA聚合酶及其转录因子相结合、决定基因转录起始与否的DNA序列。 不同的启动子对RNA聚合酶的亲和力不同,所结合的反式作用因子(trans-acting factors)也不同,因此,基因转录活性也很不相同。 二、启动子与转录启始1、启动子 典型的原核启动子有四大要素 :转录起始位点,-10区,-35区和-10区与-35区之间的间隔。 原核基因转录起始位点通常是嘌呤,其序列为CAT(A为起
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