遗传学实验设计诱变实验原理等（副本）.doc

诱变实验（设计性实验） 诱变实验（设计性实验）实验条件：野生型植株 实验条件： 实验目的：采用物理法、化学法、 实验目的：采用物理法、化学法、生物 法等多种实验手段， 法等多种实验手段，使果蝇发生诱发突 变，通过其遗传现象找出突变的规律和 特点。 特点。基本知识： 基本知识：物理诱变剂的种类常见的物理诱变剂是各种射线， 射线， 射线和中子， 常见的物理诱变剂是各种射线，如X射线，r射线和中子，此 射线 射线和中子 外还有紫外线和β射线 射线。 外还有紫外线和 射线。 X射线：波长为 射线： 埃的电离射线， 射线 波长为1000－100埃的电离射线，最早的诱变射线。 － 埃的电离射线 最早的诱变射线。 r射线：一种波长更短的电离射线，波长 －1埃，60CO和 射线： 射线 一种波长更短的电离射线，波长0.1－ 埃 137C 是目前应用最广的 射线源。 射线源。 S是目前应用最广的r射线源 中子：不带电粒子， 中子：不带电粒子，在加速器或核反应堆中得到能量范围极 广的中子。 广的中子。 β射线：电子或正电子射线束，由32P和35S等放射性同位素直 射线： 射线 电子或正电子射线束， 和 等放射性同位素直 接发生。透过植物组织能力弱，但电离密度大。 接发生。透过植物组织能力弱，但电离密度大。当同位素溶 液进入组织和细胞后作为内照射产生诱变作用。 液进入组织和细胞后作为内照射产生诱变作用。诱变机理 X射线和 射线都是能量较高的电磁波，能引起 射线和r射线都是能量较高的电磁波 射线和 射线都是能量较高的电磁波， 物质的电离。 物质的电离。当易受辐射敏感的部位受到射线 的撞击时，发生离子化，可以引起DNA链断裂， 链断裂， 的撞击时，发生离子化，可以引起 链断裂 当修复不能恢复到原状就会出现突变。 当修复不能恢复到原状就会出现突变。如果射 线击中染色体可导致断裂，修复时可造成缺失、 线击中染色体可导致断裂，修复时可造成缺失、 重复、倒位和易位等染色体畸变。中子不带电， 重复、倒位和易位等染色体畸变。中子不带电， 但当与生物体内的原子核撞击后， 但当与生物体内的原子核撞击后，使原子核变 换产生r射线等能量交换，从而影响DNA和染 换产生 射线等能量交换，从而影响 和染 射线等能量交换 色体的改变。 色体的改变。诱变方法一般采用r圃 源为中心放置处理材料， 一般采用 圃，以60CO源为中心放置处理材料， 以材料与60CO源中心距离和照射时间来控制辐射 这种r圃对于诱变育种的应用不是十分合适的 圃对于诱变育种的应用不是十分合适的， 量。这种 圃对于诱变育种的应用不是十分合适的， 室进行处理。可处理植株、 一般设置小的60CO室进行处理。可处理植株、植 株的局部、处理种子或花粉。 株的局部、处理种子或花粉。处理花粉的优点是 产生突变不至于形成嵌合体， 产生突变不至于形成嵌合体，但花粉的存活时间 短暂不易进行处理。但花粉离体培养结果表明， 短暂不易进行处理。但花粉离体培养结果表明， 玉米新鲜花粉可在常温下储存在液体石蜡油中 2.5h，对花粉活力没有影响。 ，对花粉活力没有影响。化学诱变剂种类早在1948年，Gustafsson等曾用芥子气处 年 早在 等曾用芥子气处 理大麦获得突变体。 理大麦获得突变体。1967年Nilan用硫酸二乙 年 用硫酸二乙 酯处理大麦种子育成了矮秆、 酯处理大麦种子育成了矮秆、高产品种 Luther。此后化学诱变剂的应用逐渐发展起 。 来。目前较公认的最有效和应用较多的是烷 化剂和叠氮化物两类。 化剂和叠氮化物两类。烷化剂中仍以甲基磺 酸乙酯(EMS)、硫酸二乙酯 酸乙酯 、硫酸二乙酯(DES)和乙烯亚胺 和乙烯亚胺 (EI)等类型的化合物应用较多，叠氮化合物则 等类型的化合物应用较多， 等类型的化合物应用较多 研究和应用较多。 以叠氮化钠(NaN3 )研究和应用较多。 研究和应用较多 以叠氮化钠化学诱变剂诱变机理烷化剂 指具有烷化功能的化合物,带有一个或多个 指具有烷化功能的化合物 带有一个或多个 活性烷基,该烷基转移到一个电子密度较高的分 活性烷基 该烷基转移到一个电子密度较高的分 子上,可置换碱基中的氧原子 碱基被烷化后， 可置换碱基中的氧原子， 子上 可置换碱基中的氧原子，碱基被烷化后， DNA在复制时会导致配对错误，产生突变。 在复制时会导致配对错误， 在复制时会导致配对错误 产生突变。 叠氮化钠 一种动植物的呼吸抑制剂， 一种动植物的呼吸抑制剂，可使复制中的 DNA的碱基发生替换，从而导致突变体的发生， 的碱基发生替换， 的碱基发生替换 从而导致突变体的发生， 是目前诱变率高而安全的一种诱变剂。 是目前诱变率高而安全的一种诱变剂。化学诱变剂的处理方法利用化学诱变剂处