腹泻型肠易激综合征患者肠道目标菌群的分析.pdfVIP

安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May；49(5) ·653 · 腹泻型肠易激综合征患者肠道 目标菌群的分析 李小萍 ，王巧民 ，褚 源 ，宋继中 ，沈佐君 摘要 目的 研究腹泻型肠易激综合征 (IBS-D)患者与正 2013年 1月一7月于安徽医科大学附属省立医院门 常对照者的肠道菌群差异。方法 实时荧光定量PCR法检 诊就诊的IBS—D患者5O例 (男3O例，女20例)；年 测50例 IBS—D患者及25例正常对照者粪便中长双歧杆菌 龄 18～70(44．824-13．50)岁。有下列情况的IBS—D 属、乳酸杆菌属 、脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌、大肠杆菌和粪 患者将被排除在外：① 年龄18岁；② 怀孕、哺乳 肠球菌属的数量，并对各组的目标菌群数量进行比较，计算 期或无法合作者；③ 在过去的4周 内使用过抗生 肠道定值抗力，肠道定值抗力 (CR)是指肠道内需氧的潜在 素；④ 曾有重大的或复杂的腹部手术史者；⑤ 存在 致病菌群被肠道内源性厌氧菌抑制的能力，双歧杆菌数值与 严重系统性疾病或子宫内膜异位症，或被诊断患有 肠杆菌数值之比作为肠道微生物定值抗力的指标，即B／E 值。结果 与正常对照者比较 ，IBS—D患者粪便中大肠埃希 老年痴呆症。所有参与实验组的研究对象均有临床 菌、产气荚膜梭菌的数量明显增多(P0．05)，而乳酸及双 及内镜下 胃肠检查或近 1年 内有钡剂灌肠检查。正 歧杆菌属的数量明显减少 (P0．05)，粪肠球菌、脆弱拟杆 常对照组的粪便标本选 自年龄、性别与患者组匹配 菌在两组之间比较差异无统计学意义。IBS—D患者 B／E值 的25例正常对照者，男 15例，女 10例；年龄 18—70 1，与正常对照者比较明显降低 (P0．05)。结论 IBS—D (38．76±9．33)岁。要求两组留取粪便标本前4周 患者肠道菌群平衡被打破，表现为B／E值降低，且粪便中肠 内没有消化道不适症状，且没有使用过抗生素或微 杆菌及产气荚膜梭菌数量增加，双歧杆菌、乳酸杆菌的数量 生态制剂 。 明显减少。 1．2 试剂与仪器 关键词 肠易激综合征；肠道菌群；实时荧光定量PCR 1．2．1 主要试剂 血平板、营养琼脂平板、TPY琼 中图分类号 R574．4 脂平板及改良MRS(实验室 自备)；DNA提取试剂 文献标志码 A 文章编号 1000—1492(2014)05—0653—06 盒(德国Qiagen公司)；DNA切胶 回收试剂盒、2× TaqPCRMasterMix(美国Axygen公司)；2×SYBR 肠易激综合征(irritablebowelsyndrome，IBS)是 PremixnTaqMT(北京康为世纪生物科技有限公司)。 胃肠道功能紊乱的一种常见病，其特征是病因不明 1．2．2 主要仪器 YQX．1／手套式厌氧培养箱 (上 的腹痛伴随排便习惯及大便性状的改变。尽管 IBS 不会带来严重的疾病，但它却降低了患者的生活质 海新苗医疗器械制造有限公司)；一80℃冰箱；7500 量…。传统研究肠道菌群的分离培养方法对培养 型实时荧光定量 PCR仪