流式荧光技术检测血清胃蛋白酶原ⅠⅡ方法学性能评价与应用评估.pdfVIP

·474· JClinLab 临床检验杂志2014年6月第32卷第6期Chin DOI：10．13602／j舢ki．灿2014．06．22 。产品应用研究· 流式荧光技术检测血清胃蛋白酶原I／Ⅱ方法学性能评价与应用评估 徐燕萍，李敏，赵荣平(上海交通大学医学院附属仁济医院检验科，上海200127) I／Ⅱ 摘要：目的对基于流式荧光技术检测血清胃蛋白酶原(PG)I／Ⅱ的方法学进行性能评价与临床评估。方法评价PG 定量测定试剂盒(流式荧光发光法)最低检测限、线性范围、精密度、回收率、抗干扰能力、Hook效应出现浓度、特异性，通过临 I、PG 床血清样本与Abbott公司化学发光法试剂盒进行方法比对，初步建立健康人群PGI／PGII比值的参考值范围。结果 I、PGII线 基于流式荧光技术的PGI、PGlI定量检测试剂盒检测PGI、PGⅡ检测低限分别为0．62ng／mL、0．21rig／mL。PG 性范围上限分别可达到180 rig／mL、100ng／mL。PG 5．74％。PGⅡ检测批内CV为3．47％一4．57％，室内CV为5．71％一7．43％。PGI、PGⅡ的平均回收率分别为98．5％、 414 91．7％。200ms／mL三酰甘油、10ms／mL胆红素、10ms／mLHb对各指标检测无显著影响。PGI与PGⅡ分别在16 28l rig／mL、7 ns／mL以下浓度未出现Hook效应。PGI与PGⅡ检测间不存在彼此交叉的情况。与化学发光法进行方法学比 4X-t-2．049 对，存在线性关系。线性方程分别为PGI：Y=0．968 4，相关系数(r)=0．985 0．982 I与PG 0。确定的健康人群PG I／PGlI比值第5百分位数分别为71．93ns／mL和3．57；第1百分位数分别为54．04 I、PGⅡ并行测试，方法学性能良好，能应用于临床检验并可有效提高检测 ng／mL和2．57。结论流式荧光技术可以实现PG 效率。 关键词：流式荧光技术；胃蛋白酶原I；胃蛋白酶原II；方法学性能评价 中图分类号：R446．6 文献标志码：A 间上海交通大学医学院、复旦大学附属中山医院附 按胃蛋白酶原(pepsinogen，PG)在琼脂糖凝胶 电泳下的迁移率由快至慢分PGl一PG7七种同工酶属仁济医院萎缩性胃炎患者及体检健康者的血清样 I 原，其中PGl一PG5有共同的免疫原性，合称PG本共计220例，用于方法学比对。另外2013年2月 II (又称PGA)；PG6和PG7迁移率较慢，合称PG期间从仁济医院收集187例经体检无胃部疾病的健 I、PG (又称PGC)。血清中PG11的浓度变化可以 康者血清样本用于初步建立实验室内参考值范围。 反映胃黏膜的功能情况。目前进行PG检测常用方 1．3方法按照PGI／PGⅡ流式荧光定量测定试 法有放射免疫分析法(RIA)、ELISA、化学发光法剂盒说明书要求，检测人血清中PGI和PGII。先 (CLIA)、时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA)、光激化对样本进行3倍稀释(具体稀释方法：40灿血清样 学发光免疫分析法(LICA)以及乳胶增强免疫比浊本加80止样本稀释液)，再在反应板中每孔加入 法等¨-3j。本实验评价的为一种基于流式荧光技术 25斗L缓冲液、10斗L稀释后样品、25¨L藻红蛋