出口食品小肠结肠炎耶尔森氏菌检验方法.pdfVIP

出口品小出口品小肠结肠肠结肠炎耶炎耶尔尔森氏菌森氏菌检检方法方法 Method for detection of Yersinia enterocciitica in food for exportMethod for detection of Yersinia enterocciitica in food for export SN 0174SN 0174—— 9292 代替代替ZB X04003ZB X04003—— 8686 11 主主内内容容与与用范用范围围 本本标标准准规规定了出口冷定了出口冷冻冻和生和生的的猪猪肉、肉、猪猪舌、舌、肉、肉、虾虾和和虾虾仁中小仁中小肠结肠肠结肠炎耶炎耶尔尔森氏菌森氏菌((以下以下简简称称耶氏菌耶氏菌))检检方法。方法。 本本标标准准用于出口冷用于出口冷冻冻和生和生的的猪猪肉、肉、猪猪舌、舌、肉、肉、虾虾和和虾虾仁中耶氏菌仁中耶氏菌检检其他品可其他品可参参照使用。照使用。 22 样样品制品制备备及增菌培及增菌培养养 2.12.1 如如为为冷冷冻冻品品应应于于2255℃℃下不下不18h18h褥褥冻冻。若不能及。若不能及时检时检应应放于放于--1515℃℃保存最多不能保存最多不能2d2d。冷。冷冻冻易腐的品易腐的品应应置于置于44℃℃冰箱保存冰箱保存 最多不得最多不得3d3d。。 2.22.2 无无菌操作菌操作称称取剪碎后的取剪碎后的样样品品25g(25g(猪猪舌舌应应剪取舌根、舌剪取舌根、舌两侧两侧及舌尖肉及舌尖肉))置于置于装装有有225mL225mL改良的改良的磷磷盐缓盐缓冲冲液的液的500mL500mL广广口玻璃口玻璃瓶瓶中充分振中充分振荡荡((若若 用均用均可可将将剪碎后的剪碎后的样样品品25g25g置于置于灭灭菌均菌均杯杯内内加入加入25mL25mL已已灭灭菌的改良菌的改良磷磷盐缓盐缓冲冲液以液以8 0008 00010 000r10 000r minmin均均0.5min0.5min再再将将均均好的好的样样品品 种 置入置入装装有有200mL200mL改良的改良的磷磷盐缓盐缓冲冲液的液的500mL500mL广广口玻璃口玻璃瓶瓶中充分振中充分振荡荡))然后于然后于2525℃℃培培养养4848±± 2h2h。吸取。吸取培培养养液液1mL1mL移移种于于先先热热到到2525℃℃的的装装有有9mL9mL 的的5g/L5g/L氢氢氧氧化化溶液的溶液的管中使之充分混合管中使之充分混合0.5min0.5min。立即吸取。立即吸取混合液混合液2mL2mL移移种种于于先先热到25℃的装有8mL的改良的母浸汁— 孟加拉红肉汤的 管中充分混合于25℃培养46h。 3 分离培 脂平板培养34d含吐温80的康凯琼脂平板培养48± 2h。 3.2 观察各琼脂平板有无典型或可疑耶氏菌菌落。 耶氏菌的菌落特征见表1 表1 小肠结肠炎耶尔森氏菌菌落特征 4 定 4.1 筛 4.1.1 每种琼脂平板至少应挑取两个典型或可疑菌落分别用光滑的接种穿刺并密布地接种于改良的克氏双糖琼脂各一管于25℃培养24± 2h。 4.1.2 挑取菌落后的琼脂平板应置于58℃至少保留24h以备必要时复查。 4.1.3 按表2结果行判断。 表2 改良的克氏双糖琼脂筛小肠结肠炎耶尔森氏菌 Öй