热球菌犎犑21高温α淀粉酶基因克隆表达及性质研究-海洋学报.pdfVIP

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2017-11-11 发布于天津
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热球菌犎犑21高温α淀粉酶基因克隆表达及性质研究-海洋学报.pdf

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第卷第期海洋学报，３３３Ｖｏｌ．３３Ｎｏ．３　　　　　　　年月ＡＣＴＡＯＣＥＡＮＯＬＯＧＩＣＡＳＩＮＩＣＡ２０１１５Ｍａ２０１１ｙ热球菌高温淀粉酶基因克隆、犎犑２１ α 表达及性质研究，，，，１４１４２３１４２３１４王淑军，吕明生，秦松，陆兆新，房耀维，邓祥元，林谦，刘红飞（淮海工学院海洋学院，江苏连云港；中国科学院海岸带研究所，山东烟台；南京农业大１．２２２００５２．２６４００３３．学食品科技学院，江苏南京；江苏省海洋资源开发研究院，江苏连云港）２１００９５４．２２２００１摘要：通过简并引物扩增热球菌（）高温淀粉酶保守区域之间的序列，犜犺犲狉犿狅犮狅犮犮狌狊狊犻犮狌犾犻ＨＪ２１  α 再利用技术获得两端未知序列。构建了在端添加了标签的表达载体ＳｉｔｅｆｉｎｄｉｎｇＮＨｉｓｐＥｔ２８ａ ６后转化，在诱导下表达。进一步纯化后电泳检测达到电泳Ｈｉｓ６ＴＨＪＡ犈．犮狅犾犻ＩＰＴＧＳＤＳＰＡＧＥ纯，重组酶分子量为。重组酶最适作用温度和值分别为，。重组酶在５０ＫＤａＨ９０℃ Ｈ５．０Ｈｐｐｐ＋２＋２＋＋２＋２＋２＋为时最稳定；，，，对淀粉酶活力的促进作用不显著，，，，５．５ＫＳｒＭＮａ  ＣｕＰｂＨｇ α