黑曲霉木聚糖酶基因xyna的克隆及真核表达载体-华中农业大学学报.pdfVIP

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2018-08-19 发布于天津
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黑曲霉木聚糖酶基因xyna的克隆及真核表达载体-华中农业大学学报.pdf

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第卷第期华中农业大学学报 29 5 Vol.29 No.5 年月 , 2010 10 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Oct.2010588~592 g g y 黑曲霉木聚糖酶基因xy nA 的克隆及真核表达载体的构建* 1 1 1 1 张茂刘德武林纯贺晓燕 1 2 2 1** 孟繁明周庆丰杜云平吴珍芳 , ; , 1.华南农业大学动物科学学院广州 510642 2.广东省温氏食品集团研究院新兴 527400 ( ) 。摘要从黑曲霉中克隆得到木聚糖酶基因的成熟肽编码序列通过 AserillusnierGIM3.452 xnA p g g y 重叠延伸 PCR将不带原基因信号肽编码序列的xnA基因片段和猪腮腺分泌蛋白(arotidsecretor rotein, y p yp ) , / TM , PSP基因的信号肽进行拼接得到融合片段SPA 并将其克隆到真核表达载体 pcDNA6His A中得到重组质 , 、 , 粒 pcDNA-SPA 重组质粒经过酶切测序鉴定其读码框的正确性在脂质体介导下将重组质粒 pcDNA-SPA转 ( ), , 染猪肾细胞 PK15 通过 RT-PCR证实其在 PK15细胞中表达并在细胞培养液中检测到木聚糖酶活性为 / 。 7.6IU mL ; ; ; 关键词黑曲霉木聚糖酶基因真核表达 xnA y 中图分类号文献标识码文章编号 ( ) S813 A 1000-2421201005-0588-05 TM , , 木聚糖属于半纤维素广泛存在于植物细胞壁 His A中在脂质体介导下成功将带有目的基因 ,