土壤中单宁和植酸降解菌的筛选鉴定及液态发酵研究.pdfVIP

第 40 卷 第 10 期 水 产 学 报 Vol. 40, No. 10 2016 年 10 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Oct., 2016 文章编号: 1000–0615(2016)10–1634–09 DOI: 10.11964/jfc.20160510395 土壤中单宁和植酸降解菌的筛选、鉴定及液态发酵研究 * 王晓东， 胡海滨， 麦康森， 张彦娇 ， 徐 玮， 艾庆辉， 张文兵 ( 中国海洋大学农业部水产动物营养与饲料重点实验室， 教育部海水养殖重点实验室，山东 青岛 266003) 摘要： 为从土壤中筛选能够同时降解单宁和植酸的微生物，本实验利用富集培养技 术，分离、筛选、鉴定土壤中的单宁和植酸降解菌，并研究其在液态发酵下的产酶能 力。结果显示，从土壤中共获得109株纯菌落，包括39株细菌、46株酵母菌以及24株霉 菌。分别用单宁筛选性培养基和植酸筛选性培养基筛选上述菌株，获得27株植酸降解菌 和14株单宁降解菌，其中霉菌M-6 、M-3和M-1可以同时分解单宁和植酸，且霉菌M-6 的 水解圈直径大于M-3和M-1 。在液态发酵条件下，随着发酵温度的升高(20~35°C) ，霉菌 M-6产单宁酶和植酸酶的活力呈现先升高而后降低的趋势，在发酵温度为30°C 时达到最 高值(P0.05) 。随着发酵pH 的升高(pH 4~7) ，霉菌M-6产单宁酶和植酸酶的活力呈先升高 后降低的趋势(P0.05) ；其中单宁酶活力在发酵pH值为5 时达到最高值，显著高于其他处 理组(P0.05) ；而植酸酶活力在发酵pH值为5 时达到最高值，显著高于发酵pH 4 和7处理 组(P0.05) ，但与发酵pH 6处理组差异不显著(P0.05) 。通过菌落和菌株形态学以及分子 测序方法，鉴定M-6 为黑曲霉。因此，本研究从土壤中分离筛选出3株(M-6 、M-3 和M- 1)能够同时水解单宁和植酸的降解菌，在液态发酵条件下，黑曲霉M-6产单宁酶和植酸 酶的最佳发酵温度为30 °C ，最佳发酵pH值为5 。 关键词: 降解微生物；水产饲料；单宁；植酸；液态发酵 中图分类号: S 917.4 文献标志码: A 广泛存在于植物蛋白源中的抗营养因子： 降解植物蛋白源中单宁和植酸，受到越来越多 [1-2] 单宁和植酸，是影响水产养殖动物生长性能和 的关注 。 营养物质利用水平、限制水产养殖动物对植物 目前，已有大量研究表明，自然界中的部 蛋白的利用以及制约植物蛋白在水产饲料中应 分霉菌、细菌及酵母菌等菌种，对单宁或植酸 [3-5] 用的重要原因之一。因此，去除植物蛋白源中 具有一定的降解能力 。但是，鲜有研究报道 的单宁和植酸，对于提高水产养