对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外膜蛋白表达及其分子流行病学的研究.pdfVIP

中华危重病急救医学 2015 年 7 月第 27 卷第 7 期　Chin Crit Care Med，July 2015 ，Vol.27，No.7 · 611 · · 论著 · 对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外膜蛋白 表达及其分子流行病学的研究 【摘要】 目的 分析鲍曼不动杆菌耐药情况 、分布特征，以及院内、院间主要克隆株的流行情况；探讨外膜 蛋白介导对碳青霉烯类耐药的可能机制。方法 收集青岛大学附属医院黄岛院区及解放军第四〇一医院 2013 年 7 月至 2014 年 7 月鲍曼不动杆菌临床分离株 145 株，采用纸片扩散法对其进行药敏试验；应用肠杆菌科基 因间一致重复序列聚合酶链反应（ERIC-PCR ）对菌株进行DNA 分型及同源性分析，并采用 PCR 扩增外膜蛋 白 carO 基因。随机抽取碳青霉烯耐药组 30 株鲍曼不动杆菌和敏感组 17 株鲍曼不动杆菌，用超声破碎及高 速离心法提取外膜蛋白，并用十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）分析外膜蛋白的表达情况。 结果 145 株鲍曼不动杆菌对临床常用 16 种抗菌药物普遍耐药，其中耐碳青霉烯类 128 株（耐药率 88.3% ）， 多重耐药（MDR ）137 株，泛耐药（XDR ）126 株；对米诺环素敏感率最高（79.3% ），其次是阿米卡星（40.7% ）。 碳青霉烯耐药组 carO 基因阳性率达 97.7% （125/128），碳青霉烯敏感组carO 基因阳性率达 17.6% （3/17 ）。 SDS显示 ，碳青霉烯敏感组 17 株鲍曼不动杆菌约在相对分子质量 47 000 （16 株）、 37 000 （13 株）和 29 000 （13 株）处有相应条带表达；而耐药组 30 株在这 3 处分别有 20 株、 25 株、 23 株呈不同程度的缺失或减 弱。聚类分析显示 ，145 株鲍曼不动杆菌共分为 8 个 ERIC 基因型，其中 A 型 71 株和 E 型 37 株，为主要流行株。 结论 两家医院临床分离鲍曼不动杆菌耐药情况严重且存在院内、院间流行。外膜蛋白 carO 基因在耐碳青霉 烯类鲍曼不动杆菌中广泛存在，外膜蛋白表达的缺失或减弱是鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类的重要机制之一。 【关键词】 鲍曼不动杆菌； 外膜蛋白； carO 基因； 肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链反应 A study of outer membrane protein and molecular epidemiology of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii Li Qian*, Li Zhi, Qu Yan, Li Hailing, Xing Jinyan, Hu Dan. *Department of Critical Care Medicine, Qingdao Municipal Hospital of Qingdao University, Qingdao 266000, Shandong, China Corresponding author: Hu Dan, Email: hudanicu@126.com 【Abstract 】 Objective　To study the characteristics of the distribution and drug resistance of Acinetobacter baumannii, and the epidemiology of the main strains among wards and hospitals, and to investigate the role of outer membrane protein in producing resistance against carbapenems. Methods 145 Acinetobacter baumannii strains