玉米赤霉烯酮对原代大鼠睾丸支持细胞增殖相关基因-江苏农业科学.pdfVIP

— ２９８— 江苏农业科学　２０１６年第４４卷第４期 徐明龙，郭保平，胡　进，等．玉米赤霉烯酮对原代大鼠睾丸支持细胞增殖相关基因表达以及氧化应激的影响［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４ （４）：２９８－３０２． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０４．０８５ 玉米赤霉烯酮对原代大鼠睾丸支持细胞增殖 相关基因表达以及氧化应激的影响 徐明龙，郭保平，胡　进，牛亚茹，肖　成，徐银学 （南京农业大学动物科技学院，江苏南京２１００９５） 　　摘要：研究玉米赤霉烯酮（ＺＥＡ）体外对原代大鼠睾丸支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌ）增殖相关基因波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ）和 细胞周期蛋白Ｄ１（ＣＣＮＤ１）表达及对氧化应激中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）活力的影 响。体外分离培养原代大鼠睾丸支持细胞，不同浓度的ＺＥＡ作用细胞２０ｈ，采用ＭＴＴ法检测细胞活力，荧光定量ＰＣＲ 检测 Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＣＣＮＤ１基因ｍＲＮＡ的表达，Ｗｅｓｔｂｌｏｔ检测其蛋白的表达，并且检测细胞培养液中ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活力。 结果表明：与对照组相比，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＣＣＮＤ１ｍＲＮＡ表达量都随着ＺＥＡ浓度的升高而降低，但是Ｖｉｍｅｎｔｉｎ蛋白表达量却 没有明显变化，ＣＣＮＤ１蛋白表达量和ｍＲＮＡ表达量一致。ＳＯＤ活性、ＧＳＨ－ＰＸ活性均随着ＺＥＡ浓度的升高呈现增高 趋势。结果表明，ＺＥＡ对体外培养大鼠支持细胞具有生殖毒性作用，影响Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＣＣＮＤ１的表达调控，导致细胞产生 氧化应激效应从而使ＳＯＤ与ＧＳＨ－ＰＸ活性产生变化。 　　关键词：玉米赤霉烯酮；原代睾丸支持细胞；波形蛋白；周期蛋白Ｄ１；氧化应激酶 　　中图分类号：Ｑ７８６　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０４－０２９９－０５ 　　玉米赤霉烯酮（ＺＥＡ）别称Ｆ－２毒素，是由镰刀菌产生禗 生的ＺＥＡ具有生殖发育毒性、免疫毒性，对肿瘤发生也有一 一种霉菌毒素，并且是一种类雌激素毒素。ＺＥＡ最初于１９６２ 定影响，对人、动物健康具有潜在危害，日益受到人们重视。 年从污染了禾谷镰刀菌的发霉玉米中分离得到，１９６６年正式 ＺＥＡ在全世界范围内均有发现，甚至在人们的食物中也能检 ［１－２］ ［３］ 定名 。镰刀菌主要侵害玉米、小麦、燕麦、大麦等作物，产 测到ＺＥＡ的存在 。睾丸支持细胞作为生精细胞的支架，能 够分泌雄激素结合蛋白以及产生类固醇类，为生精细胞提供 收稿日期：２０１５－０３－０２ 充足的雄性激素和必需的营养物质，同时还能保证血睾屏障 作者简介：徐明龙（１９８６—），男，安徽合肥人，硕士研究生，主要从事 和体内微循环、精子的发育和成熟，从而调节生殖系统的功 动物遗传育种研究。Ｅ－ｍａｉｌ：１４５３６７１７９６＠ｑｑ．ｃｏｍ。 ［４］ 能 。所以，支持细胞受到损伤会直接影响精原细胞、精母 通信作者：徐银学，教授，博士生导师，主要从事动物分子遗传与育 细胞、精子细胞失去发育和成熟的营养保证，导致各级生精细 种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｕｙｉｎｘｕｅ＠ｎｊａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。 櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄 素一样可以影响雏鸡鸡冠生长；其次，通过口腔饲喂的方法也 Ｅ治疗种公羊死精、畸形精子及性欲不强的效果［Ｊ］．辽宁畜牧 可以证实雄激素的同化激素甲睾酮对鸡冠的作用效果，因此 兽医，２０００（５）：１６． 给药方法不必局限于注射给药这一种方法；再次，三合激素除 ［６］徐相亭，秦豪荣，张长兴．动物繁殖技术［Ｍ］．２版．北京：中国农 对雏鸡鸡冠发育有影响外，还对雏鸡的部分内脏器官有影响。 业大学出版社