生物法合成尿苷二磷酸葡萄糖的研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３２（９）：１２５１３０ 生物法合成尿苷二磷酸葡萄糖的研究进展  陈　圣　李　艳 　刘　欢　严　明　许　琳 （南京工业大学生物与制药工程学院　南京　２１０００９） 摘要　尿苷二磷酸葡萄糖（ＵＤＰＧ）是一种重要的糖类物质合成前体。生物法合成具有低成本、无 污染和高立体选择性等传统化学法不具备的优势。利用纯酶催化的生物法以基于Ｌｅｌｏｉｒ途径改 进的一锅法、蔗糖合酶催化的两步法以及糖合成反应可逆催化等产ＵＤＰＧ，实现了ＵＤＰＧ的高产。 全细胞催化法利用稳定的胞内酶系产ＵＤＰＧ，胞内生成的ＵＤＰＧ作为底物直接参与产物的催化合 成，可行性高且成本更低。综述了酶法和全细胞催化法合成ＵＤＰＧ这两种最主要生物法的研究 进展。 关键词　尿苷二磷酸葡萄糖　生物法　酶法　全细胞催化 中图分类号　Ｑ５５ 二磷酸所组成，１９５０年由Ｌｅｌｏｉｒ和他的同事在研究半 １　引　言 ［９］ 乳糖向葡萄糖转化过程中首次发现 。其作为构建糖 　　寡糖和糖复合物在各种生物过程中起重要的作 ［１０］ 基衍生物的重要中间体 ，合成难度大且价格昂贵，故 ［１］ 用，其生物合成由不同糖基转移酶参与催化 。这些 探索如何高效合成 ＵＤＰＧ一直受到研究人员的关注。 酶区域和立体选择性地转移特异性核苷二磷酸糖的单 ＵＤＰＧ合成方法主要有化学法和生物法。化学法合成 ［２］ 糖残基合成各类糖基产物 。得益于酶工程学的快速 ＵＤＰＧ研究最早，主要有两种途径：一是偶联尿苷单磷 发展，糖基转移酶成为合成天然和非天然生物轭合物 酸盐与糖基磷酸盐；二是偶联尿苷二磷酸盐与糖基磷 ［３］ 的强大工具 。但真核生物糖基转移酶催化底物仅限 酸盐。例如，Ｍｏｆｆｔｔａ、Ｒｏｓｅｍａｎ和 Ｓｉｍｏｎ等［１１１６］以尿苷 于有限几种核苷二磷酸糖，其中尿苷二磷酸葡萄糖 ５′单磷酸盐与葡萄糖１磷酸盐偶合产 ＵＤＰＧ；Ａｒｌｔ和 （ＵＤＰＧ）就是最重要的生物合成糖甙、寡糖、多糖和糖 Ｈａｎｅｓｓｉａｎ等［１７１８］以尿苷５′二磷酸盐与糖基磷酸盐耦 ［４］ 蛋白等含糖基化合物的糖基供体之一 。ＵＤＰＧ在新 合产ＵＤＰＧ。近几年，有研究者通过制备端基特异性的 型药物和新型甜味剂的开发中得到应用。例如，ＵＤＰＧ 尿苷磷酸盐或糖基磷酸盐进行高立体选择性合成 作为糖基供体经 ＯＲＦ３６２８酶催化合成抗生素 ＢＥ ［１９２１］ ＵＤＰＧ，大大提高了ＵＤＰＧ的产率 。但化学法存在 ［５］ １４ ７５８５Ａ ；六位碳被标记的 ＣＵＤＰＧ作为唯一糖基供 反应时间长、合成效率低、成本高、立体选择性不高等 ［６］ 体经ＵＤＰ糖基转移酶催化合成甜菊糖的主要糖甙 。