分子连锁分析探讨家蚕高抗bmnpv品系的抗性遗传基础-中国农业科学.pdfVIP

中国农业科学 2017,50(1):195-204 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2017.01.017 分子连锁分析探讨家蚕高抗BmNPV品系的抗性遗传基础 1 1 1 1 2 3 1 1 高瑞 ，李春林 ，童晓玲 ，曹明亚 ，石美宁 ，徐安英 ，鲁成 ，代方银 1 2 （西南大学生物技术学院/家蚕基因组生物学国家重点实验室/农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点实验室，重庆 400715 ； 广西壮族自治区蚕业 3 科学技术研究院，南宁 530007； 中国农业科学院蚕业研究所，江苏镇江212018 ） 摘要： 【目的】家蚕核型多角体病毒（ Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV）所引发的血液型脓病是 一种传染性强的蚕病，极大地影响蚕业生产。本研究旨在定位对 BmNPV 高抗的家蚕品系中控制其抗性的基因，进 而解析其抗性遗传机制，为培育抗性素材和品系提供理论支持。【方法】以 BmNPV 高抗家蚕品系 99R 和较感品系 Dazao-N为亲本，配制连锁分析（BC F）和定位分析（BC M）回交群体。首先对两个亲本品系进行浓度梯度添毒， 1 1 统计感病死亡的家蚕头数，运用 SPSS 17.0 软件，计算其半致死剂量（LD ），在此基础上确定 BC分离群体的攻 50 1 毒剂量，并通过单头定量攻毒，选取感病个体作为连锁定位分析材料；利用筛选得到的覆盖家蚕全套常染色体的 多态性标记进行分型，并通过T检验计算各标记与抗性的连锁显著性水平（P 值），筛选出与抗性相连锁的标记。 在这些标记所在的染色体上加密标记，检测各标记在定位分析群体中的基因型，定位抗性基因。【结果】 LD 6 5 (99R)=2.92×10 个多角体/头,LD (Dazao-N)=9.78×10 个多角体/头，基于双亲的半致死剂量，选择介于两者 50 50 6 之间且略高于其均值的剂量——2×10 个多角体/头作为BC 分离群体的攻毒剂量；先后于2014年秋季和2015年 1 春季处理并检测连锁分析群体，前后两次所进行的连锁分析结果有较大差异，其中第一次找到 Chr22 上的多态性 标记 S2205 与 99R 抗性连锁，而第二次的连锁分析显示标记 S2205 与抗性不连锁，也没有找到其他的连锁关系。 通过与前人对BmNPV抗性的连锁定位分析结果进行对比，发现连锁定位分析结果的不可重复性是一个普遍的问题。 AY380833是GenBank中已公布的在家蚕高抗品系NB和871C中