产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因cggpd1 多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 construction of multicopies vectors of key enzymes gene gpd1 in glycerol synthesis of candida glycerolgenesis and its expression in escherichia coli.pdfVIP

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2017-11-13 发布于上海
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产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因cggpd1 多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 construction of multicopies vectors of key enzymes gene gpd1 in glycerol synthesis of candida glycerolgenesis and its expression in escherichia coli.pdf

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产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因cggpd1 多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 construction of multicopies vectors of key enzymes gene gpd1 in glycerol synthesis of candida glycerolgenesis and its expression in escherichia coli

第27卷第5期食品与生物技术学报 V01．27NO．5 2008年9月 ofFoodScienceand Sep． 2008 Journal Biotechnology 文章编号：1673-1689(2008)05—0050—07 产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因 CgGPDl多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达王震1一，饶志明¨“，诸葛斌1’2，沈微1’2，方慧英1’2，诸葛健1’2 (1．江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡214122；2．江南大学生物工程学院，江苏无锡214122) 摘要：采用PCR的方法从产甘油假丝酵母(Candida gZyfP一加gP以已s)中扩增出3一磷酸甘油脱氢酶的编码基因及侧翼序列CgGPDl，分别构建了含不同CgGPDl拷贝数的根癌农杆茵双元载体 zeocin-Cg NaCl、葡萄糖胁迫下表达情况。结果表明，在大肠杆菌中GPDH的活性随着NaCl、葡萄糖质量浓 NaCl下平均度的升高而增加。当NaCI质量浓度达到．2．5g／dL时，GPDH的酶活比在O．5g／dL 提高31．2％；当葡萄糖质量浓度提高至10g／dL时，GPDH的酶活比2g／dL葡萄糖下平均提高平均提高9．9％。以上结果表明，在大肠杆菌中CgGPDl基因的表达同样受渗透压胁迫调节。关键词：胞浆3一磷酸甘油脱氢酶；产甘油假丝酵母；渗透压胁迫中图分类号：Q939．97 文献标识码：A Constructionof Vectorsof GeneGPDlin MulticopiesKeyEnzymes ofCandida GlycerolSynthesis glycerolgenes诋and Its inEscherichiacoli Expression WANG Jianl2 Zhenl一，RAOZhi-ming。1一，ZHUGEBinI．-，SHENWeil一，FANGHui-yingj”，ZHUGE ofIndustrial of 214122，China； (1．KeyLaboratory Bioteehnology，MinistryEducation，JiangnanUniversity，Wuxi 2．SchoolofBiotechnology，JiangnanUniversity，Wuxi214122，China) Abstract：Candida a novelosmotolerantusedforindustrial—scale gZycPr西209P咒已5， yeast， fermentationand of keyenzymeglycerolsynthesis，was glycerol～3一phosphatedehydrogenase，the inducedosmoticstress．Inthis the of gene glycerol一