Marc-145细胞传代培养条件优化.pdfVIP

动物科学 现代农业科技 2013年第23期 Marc一145细胞传代培养条件优化 赵 潇 秦 钢 (浙江经贸职业技术学院，浙江杭州 310018) 摘要 采用单因素法研究在细胞传代培养过程中复苏温度、血清浓度、生长液pH值、培养温度、消化液浓度、传代 比例等因素对Marc一 145细胞传代培养的影响。结果表明：复苏温度 37℃、血清浓度 10％、生长液pH值 7-2、培养温度 37℃、消化液浓度 0．25％、传代 比例 1：3时 Marc一145细胞传代培养效果最佳。 关键词 Marc一145细胞；传代培养 ；单因素试验 ；条件优化 中图分类号 $852．65 文献标识码 A 文章编号 1007—5739(2013)23—0270—02 Optimization ofSubculture ConditionsforMarc-145 Cells ZHAOXiao QINGang (ZhejiangEconomicTradePolytechnic，HangzhouZhejiang310018) Abstract Usingsingletest，theeffectofrecoverytemperatureserumconcentration，growthsolutionpHvalue，incubationtemperature，concentration ofdigestivefluidandpassagerateonthesubcultureforMarc一145cellswasstudied．TheresultsshowedthatthebestsubcultureconditionsofrMrac一 145cellswaswhentherecoverytemperaturewas37℃，theserumconcentrationwas1o％，growthsolutionpHvaluewas7．2，incubationtemperaturewas37 oC．concentrationofdigestivefluidwas0．25％．andpassageratewas1：3． Keywords Marc一145cells；subculture：singletest：conditionoptimization Marc一145细胞为上皮样细胞 ，来源于猴肾细胞 ，从母细 (1)复苏温度对Marc一145细胞传代培养的影响。取 5支 胞 (MA104细胞)克隆而得到 ，可连续传代培养lll。Marc一145 冻存种细胞的冻存管 ，立即放入 25、30、35、37、40℃的水浴 细胞作为猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)的受体细胞 ， 中至彻底融化后接入 5个小方瓶中，编号为 1～5，分别加入 近年来已被得到广泛应用。当前．为了获得生长 良好的Marc一 pH值为7．2、血清含量为 10％的DMEM生长液 20mL．置于 145细胞 ，以便在细胞上获得更高滴度 的PRRSV，则必须优 37cC的 CO：培养箱中培养4-6h后换掉 1次生长液 ，培养 化细胞传代培养条件[21。细胞传代培养条件包括细胞 的复苏 48h后取出放置倒置显微镜下观察。 条件 、传代培养中细胞培养温度 、血清浓度 、细胞消化时间、 (2)血清含量对 Marc一145细胞传代培养 的影响 。取一 消化液浓度 、细胞传代比例等 。本文就关于Marc一145细胞 细胞生长状态 良好的大方瓶细胞 ，经消化 ，加入pH值为 7．2 传代培养的几个影响因素进行了探讨 ，为优化 Marc一145细 的DMEM液 100mL，摇匀 ，平均分装到5个小方瓶里 ，编号 胞传代培养提供一定理论依据 。 1～5，向其中各加入 2％～10％的新生牛血清后 ．置于 3