高效液相色谱法测定环二酰胺酶催化水解马来酰亚胺动力学参数 determination of kinetic parameters of a cyclic imidase hydrolyzing maleimide by high performance liquid chromatography.pdfVIP

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高效液相色谱法测定环二酰胺酶催化水解马来酰亚胺动力学参数 determination of kinetic parameters of a cyclic imidase hydrolyzing maleimide by high performance liquid chromatography

第25卷第2期 食品与生物技术学报 v01.25Nn2 2006年3月 ofFoodScienceand Mar. 2006 Journal Biotechnology 文章编号:1673—1689(2006)02-0048—04 高效液相色谱法测定环二酰胺酶催化水解 马来酰亚胺动力学参数 石亚伟,崔丽方,袁静明 (山西大学生物技术研究所,山西太原030006) 摘要:采用高效液相色谱法(HPLC)分析并测定了环二酰胺酶水解马来酰亚胺反应的动力学参 mm×150 mmol/LK2HPOt~ 教。以SymmetryoCl。拄(4.6 mm,5且m)为色谱拄,甲醇:10 nm,流速1.0 6.5)体积比5:95为流动相,检测波长为255 mL/min等色谱 KH:P04缓冲液(pH 倒敷作图法求得环二酰胺酶催化马来酰亚胺水解的动力学参数为K。一39.09mmol/L,V。。一 154.02 750.4 mmol/(L‘ min~,&。。/K。一735.5 txmol/(min·rag),V…/K=3.94,^。。一28 min)。30min环二酰胺酶催化底物马采酰亚胺转化率达到95%。该方法快速、准确、重复性好。 关键词:高效液相色谱;环二酰胺酶;马来酰亚胺;马来酰胺酸;动力学参数 201.25 中图分类号:TS 文献标识码:A DeterminationofKineticParametersofa Imidase Cyclic Hydrolyzing MaleimidePerformance byHigh LiquidChromatography SHI Ya—wei,CUI Jing-ming L卜fang,Yuan (Instituteof 030006,China) Bioteehnology,ShanxlUniversity,Taiyuan ofa imidasewithmaleimideasthesubstratewas Abstract:Kinetic assayedby parameterscyclic HPLCmethod.The ofthereactionmixturewasconductedona column separation SymmetryC18 withmethanol:10 6.5(5:95 themobile ataflow mmol/L v/v)as phase

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