16S rRNA基因的PCR-DGGE技术分析茶尺蠖幼虫肠道细菌种群结构及多样性.pdf

第31卷 第6期 江 西 科 学 Vo1．3lNo．6 2013年 l2月 JIANGXI SCIENCE Dec．20l3 文章编号：100l一3679(2013)06—0759—06 ● 16SrRNA基 因的PCR—DGGE技术分析 茶尺蠖幼虫肠道细菌种群结构及多样性 靳 亮 ，王金 昌 ，王洪秀2，张贱根。，杨 罡 ，靳海燕 (1．江西省科学院微生物研究所 ，江西 南昌330029；2．江西省农业科学院农业应用微生物研究所 ，江西 南昌330200； 3．江西省蚕桑茶叶研究所，江西 南昌330202；4．山东省新泰市羊流镇杨家庄小学 ，山东 新泰271200) 摘要：利用 16SrRNA的PCR．DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术分析研究了茶尺蠖肠道内细菌的种类与多样 性。通过对 16SrRNA序列分析，从茶尺蠖野外种群肠道 中鉴定了l1种细菌，这些细菌分属于沃尔巴克氏菌 (Wolbachia)、肠杆菌属(Enterobacter)、沙雷氏茵属 (Serratia)、梭菌属 (Clostridium)、肠球菌属 (Enterococcus)、暂 定类群EO1；其中以肠杆菌、沃尔巴克氏菌、沙雷氏菌属最为常见。另外，也鉴定了一种茶树叶绿体上的16S rRNA基因。茶尺蠖幼虫体 内的共生茵多样性分析结果，将会为害虫综合治理提供一奈全新的探索途径。 关键词：茶尺蠖；肠道细菌；16SrRNA序列；变性梯度凝胶 电泳；多样性 中图分类号：Q968．1 文献标识码 ：A BacterialCommunityinM idgutsofEctropicoblique LarvaebyPCR—DGGE and 16SrRNA GeneLibraryAnalysis JINLiang ，WANGJin—chang ，WANG、Hong．xiu ，ZHANGJian—gen ，YANGGang，JIN Hal—yan (1．InstituteofMicrobiology，JiangxiAcademyofSciences，JiangxiNanchang330029PRC； 2．InstituteofAgriculturalAppliedMicrobioloyg ， JiangxiAgriculturalAcademyofSciences，JiangxiNanchang330200PRC； 3．InstituteofSericuhureandTea，JiangxiNanchang330202PRC； 4．YangliuTown，YangjiazhuangPrimarySchool，ShandongXintai271200PRC) Abstract：BacterialcommunityinmidgutsofEctropicobliquelarvaewerestudiedbyPCR—DGGEand 16SrRNA genelibraryanalysis．By16SrRNA V3regiongeneDGGEmethod，elevendistinctbands wereobtainedfrom 16SrDNA amplificons．Thebandswerepurified，sequenced．Thesequenceswere alignedwithGenBankdatabaseandshowedthattheywerebelongedto6differentgeneraofbacteria． PhylogeneticanalysisshowedthatthesequencesofbacteriabelongedtotheWolbachia，Enterobacter，